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            上海滬鼎生物科技有限公司>>ELISA試劑盒>>其它類elisa試劑盒>>DB1656-QT游離脂肪酸(NEFA)ELISA試劑盒

            游離脂肪酸(NEFA)ELISA試劑盒

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            • 游離脂肪酸(NEFA)ELISA試劑盒

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            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            • 型號(hào) DB1656-QT
            • 品牌 其他品牌
            • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
            • 所在地 上海市

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            更新時(shí)間:2024-09-26 10:43:46瀏覽次數(shù):425

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 一個(gè)月 規(guī)格 96T
            貨號(hào) DB1656-QT 主要用途 僅供科研
            本試劑盒用于測(cè)定樣本中游離脂肪酸(NEFA)的含量。

            詳細(xì)介紹

            本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定標(biāo)本中游離脂肪酸(NEFA)水平。用純化的游離脂肪酸(NEFA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入游離脂肪酸(NEFA),和HRP標(biāo)記的游離脂肪酸(NEFA)抗原,使它們競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的游離脂肪酸(NEFA)的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中游離脂肪酸(NEFA)的含量。  

            標(biāo)本要求

            1.標(biāo)本處理:(1)水樣   采集后經(jīng) -20℃反復(fù)凍融三次,再經(jīng)玻璃纖維過(guò)濾后,備查

            (2)組織   樣品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相關(guān)文獻(xiàn)提取進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,備查

            2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

            操作步驟

            1. 加樣:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)孔中加50微升,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

            2. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。  

            4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

            6. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

            7. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

            8. 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。




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