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動物細(xì)胞/組織線粒體粗提分離試劑盒
閱讀：1117 發(fā)布時(shí)間：2016-10-31主要用途:
動物細(xì)胞/組織線粒體粗提分離試劑是一種旨在從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的
而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和培
養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理
生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品
佳。
保存方式:
保存凈化液在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6 月
用戶自備：
HANK 平衡鹽緩沖溶液或PBS 緩沖溶液：用于清理細(xì)胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液：用于細(xì)胞脫離
*細(xì)胞培養(yǎng)液：用于細(xì)胞處理所需的培養(yǎng)基
15 毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備物的存放
50 毫升錐形離心管：用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗
1.5 毫升離心管：用于保存線粒體
4℃臺式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞
4℃超速離心機(jī)：用于分離細(xì)胞器成分
DOUNCE 勻漿器：用于裂解細(xì)胞
注意事項(xiàng)：
1． 本產(chǎn)品為10 次（1 克動物組織或5 X 107 細(xì)胞）或50 次（200 毫克動物組織或1 X 107 細(xì)胞）操作
2． 實(shí)際操作的動物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如200 毫克動物組織：試劑用量是標(biāo)
準(zhǔn)用量的五分之一
3． 所有操作均須嚴(yán)格在4℃或以下狀態(tài)進(jìn)行
4． 操作時(shí)，須戴手套
5． 操作時(shí)，須無菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（Reagent B）和保存液（Reagent E）
6． 建議使用足夠的樣品量
7． 建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間
8． 通常勻化次數(shù)為20 至40 下（或細(xì)胞顆粒群/組織塊狀消失為止）達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但
不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3 微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)
胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)
9． 通常孵育5 分鐘（不宜超過5 分鐘）達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會存
在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3 微升裂解物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50
％可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)
10．對于難以裂解的細(xì)胞，例如HeLa 細(xì)胞，采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理
11．通常1 克動物組織或5 X 107 細(xì)胞的線粒體含量為50 微克以上線粒體蛋白
12．如果需要計(jì)量線粒體，稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成，否則線粒體將分解
13．本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g，可以提高粗提
的線粒體純化程度，但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少
14．如果需要獲得99％以上純度的線粒體，使用動物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒
15．線粒體正?；钚詼y定方法是： CITRATE SYNTHASE 活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等
16．線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是：CYTOCHROME C OXIDASE 活性和熒光JC 染色
17．本公司提供線粒體套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等
18．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品