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DMEM低糖培養(yǎng)基配制方法
閱讀：2999 發(fā)布時(shí)間：2015-7-1DMEM低糖培養(yǎng)基
DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時(shí)又分為高糖型（低于4500g/L）和低糖型(低于1000g/L)。高糖型有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長，適于生長較快、附著較困難腫瘤細(xì)胞等。
優(yōu)勢：
1.溶解使用的是WFI水系統(tǒng)，具有*的質(zhì)量
2.在我們標(biāo)準(zhǔn)的500ml及1L包裝瓶中批量大達(dá)2000L
3.在我們的5、10、20、50、100與200L的多種規(guī)格的BPC中批量大達(dá)10000L
4.所有標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品均為0.1μm過濾
這種培養(yǎng)基的特點(diǎn)：
（1）氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等
（2）維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍；
（3）含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)——丙酮酸
（4）含有微量的鐵離子。 該類培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于疫苗生產(chǎn)和各種初代病毒宿主細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)及單一細(xì)胞培養(yǎng);如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等細(xì)胞系的培養(yǎng)。
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配制方法 ：
（1）在一個(gè)盡可能接近總體積的容器中加入比預(yù)期培養(yǎng)基總體積少5％的雙蒸水。
（2）在室溫（20℃到30℃）的水中加入干粉培養(yǎng)基，輕輕攪拌，不要加熱。
（3）水洗包裝袋的內(nèi)部，轉(zhuǎn)移全部的痕量干粉到容器內(nèi)。
（4）加NaHCO3到培養(yǎng)基中。
（5）用雙蒸水稀釋到想要的體積，攪拌溶解。注意不要過分?jǐn)嚢琛?
（6）通過緩慢攪拌加入1N NaOH 或1N HCL調(diào)節(jié)pH值，由于pH值在過濾時(shí)會(huì)上升0.1到0.3，因而調(diào)節(jié)pH值使它比終想要的pH值低0.2到0.3。培養(yǎng)基在過濾前要保持密封。
配制培養(yǎng)基要注意以下問題：
1.認(rèn)真閱讀說明書。說明書都注明干粉不包含的成分，常見的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等。這些成分有些是必須添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要決定。
2.配制是要保證充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物質(zhì)都要等培養(yǎng)基*溶解之后
3.配制所用的水應(yīng)是三蒸水，離子濃度很低。
4.所用器皿應(yīng)嚴(yán)格消毒。
5.配制好的培養(yǎng)基應(yīng)馬上過濾，無菌保存于4度。
6..液體培養(yǎng)基主要是為了科研工作的方便而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，它是一種滅菌后保證
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