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            技術(shù)文章

            HL10118.1細胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書

            閱讀:1205          發(fā)布時間:2016-6-14

            主要用途

                    我公司細胞/組織溶酶體粗提分離試劑是一種旨在從動物細胞或組織中分離出完整而純化的溶酶體細胞器的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細胞的溶酶體的制備。

            注意事項

            • 本產(chǎn)品為10次(1克動物組織或 108細胞)操作
            • 所有操作均須嚴格在4或以下狀態(tài)進行
            • 操作時,須戴手套
            • 操作時,須無菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(Reagent B)分離液(Reagent E
            • 建議使用足夠的樣品量
            • 建議嚴格控制操作時間
            • 通常勻化次數(shù)為20至40下(或細胞顆粒群/組織塊狀消失為止)達到80%的細胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細胞裂解程度:完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)
            • 通常孵育5分鐘(不宜超過5分鐘)達到80%的細胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細胞裂解程度:完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)
            • 對于難以裂解的細胞,例如HeLa細胞,采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理
            • 通常1克動物組織或 108細胞的溶酶體含量為300微克左右溶酶體蛋白

            11. 如果需要獲得99%以上純度的溶酶體,使用細胞/組織高質(zhì)純化溶酶體分離試劑盒-10118.3 

            • 溶酶體標志酶活性測定,建議使用通用型N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶NAG)活性比色法定量檢測試劑盒0031.1和純化溶酶體酸性磷酸酶活性比色法定量檢測試劑盒50318.3 
            • 溶酶體形態(tài)和功能染色,建議使用細胞溶酶體形態(tài)染色試劑盒10121和純化溶酶體功能中性紅檢測試劑盒10323 
            • 本公司提供系列溶酶體分析試劑產(chǎn)品
            • 如:
            • 細胞/組織活性溶酶體分離試劑盒
            • 細胞/組織高質(zhì)純化溶酶體分離試劑盒

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