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            技術(shù)文章

            線粒體呼吸鏈復合物III活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

            閱讀:1346          發(fā)布時間:2016-6-21

            主要用途

            我公司線粒體呼吸鏈復合物III(輔酶Q-細胞色素C還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用還原性合成輔酶Q同功類似物和特異性抑制劑,通過反應系統(tǒng)測定樣品中細胞色素C還原后峰值的增高,即采用比色法測定樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的輔酶Q-細胞色素C還原酶的特異性活性檢測。可用于衰老、能量代謝、蛋白組學、病理身理學、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應優(yōu)化,檢測敏感。

            注意事項

            • 本產(chǎn)品為21次操作(10個樣本),包括1次背景對照測定
            • 操作時,須戴手套
            • 系統(tǒng)操作過程中,背景測定只需1次
            • 線粒體樣品檢測前,須溶解;建議凍存融解(-70℃至37℃)循環(huán)3次
            • 如果增強酶活檢測,建議使用線粒體復合物待測樣品預處理試劑盒-10342
            • 每增加1個樣品,增加反應工作液為:反應液(Reagent B5微升+穩(wěn)定工作5微升,以此類推。配制反應工作液時,須根據(jù)樣本數(shù)量配制實際工作液容量
            • 用戶可以根據(jù)實際樣品,計算緩沖液(Reagent A、反應工作底物液(Reagent D三者之和,混勻后,室溫下靜置10分鐘,置于冰槽里等待檢測
            • 加入樣品啟動反應后3秒內(nèi)即刻比色測定
            • 分光光度計波長嚴格設置在550nm,誤差10nm將不產(chǎn)生信號
            • 測定可以持續(xù)2分鐘
            • 測定值由低到高變化,即2分鐘測定讀數(shù)高于0分鐘測定讀數(shù),表明有酶活性
            • 比色測定后,比色皿須清洗*
            • 建議用戶使用分光光度儀檢測,總體系減半可以增加檢測樣本數(shù)
            • 建議待測樣本線粒體蛋白濃度為10微克/100微升;如果樣本酶活性過低或過高,則可以增加或降低樣本量;注意計算公式的調(diào)整(本公司提供線粒體溶解試劑盒HL10018為后續(xù)的線粒體蛋白濃度測定的預處理試劑盒和 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒HL30030.1)
            • 如果使用細胞或組織裂解液,則蛋白濃度為50微克/100微升
            • 樣品特異活性是指抗霉素敏感的輔酶Q-細胞色素C還原酶,去除其它干擾因素(例如復合物I/II/IV等)
            • 線粒體呼吸鏈復合物III(輔酶Q-細胞色素C還原酶)單位活性定義為:在30℃,pH 7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠氧化1微摩爾還原型泛醌(CoQH2)所需的酶量作為一個活性單位
            •  
            • 本公司提供系列線粒體及其酶類技術(shù)產(chǎn)品 
            • 如:
            • 線粒體呼吸鏈復合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性定量檢測試劑盒
            • 線粒體呼吸鏈復合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性定量檢測試劑盒
            • 線粒體呼吸鏈復合物IV(正鐵細胞色素C-氧化還原酶)活性定量檢測試劑盒
            • 線粒體呼吸鏈復合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶)活性定量檢測試劑盒 

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