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5個(gè)技巧助您輕松應(yīng)對(duì)類器官移液挑戰(zhàn)
近年來，類器官技術(shù)進(jìn)入新的發(fā)展階段，從科研實(shí)驗(yàn)室逐漸融入到醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)和制藥等諸多領(lǐng)域，帶來了翻天覆地的變革。類器官培養(yǎng)是一項(xiàng)系統(tǒng)工程，需要多個(gè)維度的標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范，評(píng)價(jià)類器官養(yǎng)的好不好，除了精巧的培養(yǎng)環(huán)境設(shè)計(jì)外，專業(yè)化的類器官團(tuán)隊(duì)都有必要建立有待不斷規(guī)范化的實(shí)驗(yàn)流程SOP[1]。
但是，利用微量移液工具移取類器官活細(xì)胞組織可能是一個(gè)令人頭疼的問題。移液作為類器官培養(yǎng)過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，很大程度上影響到了類器官細(xì)胞分配的活性和均一性，我們特別總結(jié)了5個(gè)分液技巧，助您輕松搭建標(biāo)準(zhǔn)化工作流程。
類器官培養(yǎng)物樣品移液面臨的挑戰(zhàn)
培養(yǎng)類器官是一個(gè)漫長的過程，需要對(duì)培養(yǎng)條件進(jìn)行多次調(diào)整，以促進(jìn)類器官的形成和成熟。所有三維培養(yǎng)物都需要一個(gè)初始細(xì)胞源——這個(gè)細(xì)胞源一般來自珍貴的臨床活檢或手術(shù)切除樣本，或具有干細(xì)胞特性的特定細(xì)胞。
移液作為三維細(xì)胞培養(yǎng)各階段工作不可避免的基本組成部分，每個(gè)移液動(dòng)作可能只持續(xù)幾秒鐘，但使用正確的工具和技術(shù)對(duì)于成功創(chuàng)建類器官培養(yǎng)物和保持培養(yǎng)物批間一致性非常重要。特別是在處理三維細(xì)胞培養(yǎng)等挑戰(zhàn)性樣本時(shí)，需要特別注意以下方面：
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三維細(xì)胞模型比二維細(xì)胞培養(yǎng)物更脆弱。移液力度過大可能會(huì)破壞這些結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響細(xì)胞的行為和存活。
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為了讓類器官均勻生長并生成可靠的數(shù)據(jù)，您需要讓細(xì)胞在三維結(jié)構(gòu)中均勻分布。不一致的移液操作會(huì)導(dǎo)致一個(gè)區(qū)域細(xì)胞集中成團(tuán)，而另一個(gè)區(qū)域細(xì)胞較少。
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用于支持類器官形成的基質(zhì)介質(zhì)（如 Matrigel 或水凝膠）液體非常粘稠，處理時(shí)增加了移液的難度。
處理類器官的五個(gè)移液技巧
移液動(dòng)作雖然簡單，但移液器卻是一種復(fù)雜的儀器。除了清潔和維護(hù)外，基本移液技巧還有很多變化，尤其在處理三維細(xì)胞培養(yǎng)等具有挑戰(zhàn)性的樣品時(shí)，以下這五個(gè)移液技巧將會(huì)顯著提升您的移液操作水平：
1
調(diào)整您的移液技巧
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在將源細(xì)胞接種到特殊的生長培養(yǎng)基、更換培養(yǎng)基抑或收獲細(xì)胞時(shí)一定要緩慢。輕柔、一致地移液對(duì)于保持類器官精密的結(jié)構(gòu)完整性也至關(guān)重要。
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對(duì)于水凝膠等粘性溶液，應(yīng)采用反向移液。
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在應(yīng)對(duì)需要混合類器官培養(yǎng)試劑的場景，電動(dòng)移液器可幫助您找到并設(shè)定極佳的混合時(shí)間和速度以獲得均勻混合的結(jié)果。
2
選擇合適的移液器吸頭
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最新的ISO 8655:2022 移液器校準(zhǔn)指南強(qiáng)調(diào)移液器和吸頭是一整套系統(tǒng)工具。
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始終使用同一制造商生產(chǎn)的移液器和吸頭以獲得最佳移液效果。
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靈活考慮不同的吸頭選項(xiàng)，例如寬孔吸頭非常適合某些三維細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。
3
規(guī)范您的實(shí)驗(yàn)方案
移液的微小差異都會(huì)導(dǎo)致數(shù)據(jù)的變化。為您的三維細(xì)胞培養(yǎng)工作流程制定標(biāo)準(zhǔn)化移液實(shí)驗(yàn)方案，讓實(shí)驗(yàn)室中的每個(gè)人都遵循相同的程序。
使用電動(dòng)移液器如Picus® 電動(dòng)移液器，讓實(shí)驗(yàn)室中的每個(gè)人遵循相同的程序。
4
不要忽視人體工學(xué)
長時(shí)間移液會(huì)讓人感到疲勞。
賽多利斯符合人體工程學(xué)的設(shè)置和正確的移液技術(shù)可以減輕疲勞，提高整體精度，使用起來明顯更舒適，并能有效防止手部疲勞。
5
定期保養(yǎng)您的移液器
未校準(zhǔn)的移液器會(huì)給細(xì)胞實(shí)驗(yàn)帶來負(fù)面結(jié)果。
請(qǐng)按照制造商推薦的維護(hù)計(jì)劃定期校準(zhǔn)移液器，使其保持最佳工作狀態(tài)。
成為類器官移液實(shí)驗(yàn)大滿貫選手
每種三維細(xì)胞模型在反映疾病特征方面都有其固有的局限性，合適的三維細(xì)胞模型是基礎(chǔ)研究和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)成功應(yīng)用的基礎(chǔ)。隨著科學(xué)家對(duì)疾病驅(qū)動(dòng)因素和治療方法的深入了解，我們應(yīng)更加關(guān)注包括類器官在內(nèi)的三維細(xì)胞模型構(gòu)建流程的標(biāo)準(zhǔn)化，賽多利斯創(chuàng)新的移液產(chǎn)品解決方案和類器官實(shí)驗(yàn)移液技巧定能助您在這一領(lǐng)域的研究中乘風(fēng)破浪。
此外，我們于今年隆重推出的自動(dòng)化納升級(jí)分液系統(tǒng)I.DOT MINI將助您在基于多孔板的類器官培養(yǎng)液分液、不同藥物濃度梯度或組合刺激的復(fù)雜高通量三維細(xì)胞模型實(shí)驗(yàn)中獲得極微量、超快速、更節(jié)省的自動(dòng)化分液體驗(yàn)。下游結(jié)合強(qiáng)大的Incucyte 實(shí)時(shí)活細(xì)胞成像分析系統(tǒng)針對(duì)多孔板中類器官的生長和活力進(jìn)行全自動(dòng)長時(shí)程觀察，加速實(shí)現(xiàn)類器官培養(yǎng)分液和形態(tài)學(xué)監(jiān)測的標(biāo)準(zhǔn)化自動(dòng)工作流程。
I.DOT MINI
Incucyte®
我們還特意制作了3D細(xì)胞模型移液器移液技巧錦囊海報(bào)一份，我們將回到基礎(chǔ)知識(shí)，探討實(shí)驗(yàn)室研究人員最習(xí)以為常的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)技術(shù)：移液。探索在利用微量移液器移取三維細(xì)胞培養(yǎng)物時(shí)面臨的常見挑戰(zhàn)以及克服這些挑戰(zhàn)的一些技巧。
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-參考文獻(xiàn)-
[1] Standardization of organoid culture in cancer research. Cancer Med, 2023 Jul;12(13):14375-14386. doi: 10.1002/cam4.5943. 2023 Apr 20.