胰島素放免試劑盒，INS放免試劑盒說明書下載

[藥品名稱]
通用名：碘[125I]- 胰島素放射免疫分析藥盒盒
漢語拼音：Dian[125I] Yidaosu Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名:Iodine[125I]- Insulin Radioimmunoassay Kit
簡稱：碘[125I] 胰島素（Ins）放免藥盒
[使用目的]
用于定量測定科研血清或血漿中胰島素（Ins）的濃度。
[用途]
胰島素的測定主要用于對糖尿病的分型，即通過胰島素釋放實驗，區(qū)分糖尿病的類型。
另外對于研究胰島素β細胞的分泌功能、胰島素瘤的分析、探討冠心病機理等也有一定的意
義。
[試驗原理]
本品采用了第二抗體＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理：含胰島素（Ins）的樣
品和125I 標記的胰島素（Ins）與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應后加入二抗及
PEG，使免疫復合物沉淀，離心，測沉淀放射性計數。通過標準曲線得到樣本中胰島素（Ins）
的濃度。
[試劑主要組成成分]
1、胰島素標準品：6 瓶，凍干品A-F，濃度分別為7、20、40、90、180、350mIU/L，使用
時加1.0ml 溫育液溶解。
2、質控血清：兩瓶，凍干品，使用時加0.5ml 蒸餾水溶解。
濃度為： L： H：
3、抗Insulin 血清： 一瓶，藍色溶液，2～8℃冷存。
4、125I-Insulin 標記物：凍干品1 瓶，< 88.23 kBq/100T，50 管加5.5ml，100 管加11ml，200
管加22ml 溫育液溶解。
5、分離劑： 一瓶，含二抗血清、PEG 等，充分搖勻后使用，2～8℃冷存。
6、溫育液：一瓶，2～8℃冷存。
[儀器]
1、γ－計數器2、低溫離心機
樣本收集和保存：
220 微升科研血清樣本。
采靜脈血5ml 于塑料試管中，靜置使其凝固后，1500 轉／分離心，取其上清液，放置玻
璃瓶中。如果樣本不立即使用，可在-18℃~-25℃儲存6 個月。
嚴重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結果有影響。
[使用前準備]
試驗前，恢復樣本至室溫，小心搖勻血清樣本。
[實驗方法]
1、將實驗所需試劑及樣本放置室溫，凍干品按操作要求進行溶解,平衡至少30 分鐘
以上才可進行操作；
2、取60X12mm 聚苯乙烯管進行編號，所有實驗均做雙管重復；
3、每個NSB 管加入200μl 溫育液，每個標準品“0”管加入100μl 溫育液；
4、取每個濃度的標準品（A~F）、質控血清和樣本100μl 加入相應編號的試管中；
5、每管均各加入100μl 標記物工作液；
6、每管均各加入100μl 抗體工作液，充分混勻；
7、37℃溫育2 小時；
8、每管均各加入500μl 分離劑后，充分混勻；
9、室溫放置15 分鐘后，離心3500 轉／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液；
10、用γ-計數器測定各管計數CPM. 推薦檢測時間: 1 分鐘；
11、從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。
操作流程(Assay Procedure)
T
NSB 標準品(Standards) 樣品(Samples)
O A B C D E F 1 2 …..
溫育液
(Incubate
solution)
200 100
標準品(STD)
A－F 100 100 100 100 100 100
樣品(Samples) 100 100 ….
125I-Ins
抗INS 血清
(Anti-Ins)
混勻，置37℃水浴溫育2 小時(Vortex and Incubate 2 hour at 37℃)
分離劑(Pr) 500
搖勻，室溫放置15 分鐘，3500RPM 離心20 分鐘（溫度低于25℃）
Vortex，Deposit under room temperature for 15minute，Centrifuge for 20 minutes at3,500
RPM （Below25℃）
吸去上清液Aspirate the Supernate of the tubes
沉淀物計數1 分鐘Count for 1 minute
[實驗過程中應注意]
1、γ-計數器本底計數應≤100CPM/分，效率應≥75％；
2、加入放射性標記物時，應做好防護、小心謹慎，以避免造成放射性污染；
3、如果某一個樣本的測定值高于zui高濃度的標準品濃度，用零標準品以1：2 或1：
4 的比例稀釋樣本后重新測試，測試結果乘以相應的稀釋倍數。
[質量控制]
每次實驗操作應至少采用兩個濃度的質控血清進行質量控制，以確保每次實驗測定結果
的可靠性。
100
100
1、質控血清的平均值應在允許范圍內；
2、曲線方程應采用*擬合方式；
3、重復樣本的測定結果相差在15％以內。
如不能同時滿足以上條件，則此次試驗結果無效，全部試驗需重新進行。
[測定結果的計算]
1、計算標準品（A~F）、質控品和樣品與標準品0 的比值（B/B0）;
2、劑量-反應曲線按“對數劑量-結合率對數”（Log(dose-Log(B/Bmax))數學模型
或四參數數學模型擬合，通過每個標準品的B/B0 和其濃度建立標準曲線；
3、從標準曲線上查出樣本的濃度值，B/B0 不在標準曲線之內的樣本及其濃度
[實驗的局限性]
1、本品僅供體外診斷使用，只能用于科研血清或血漿樣本的測定而不能用于其他體
液樣本；
2、通過其它方法得到的T 值與本品測定結果不具有直接的可比性；
[產品性能指標]
1、靈敏度：
取藥盒中校準試劑0 劑量作10 平行管，求其均值X 及偏差SD，從劑量—反應曲線上
查出與X+2SD 相對應的劑量值，確定為本藥盒的靈敏度（zui小檢出值），為0.17mIU/L。
2、精密度：
精密度是質量控制的基本參數，用批內變異系數和批間變異系數確定。要求批內變
異系數< 10% ，批間變異系數< 15% 。
批內變異系數:指不同濃度的三個樣品C1、C2、C3 同時分別進行多個復管一次測定中的
重復性，應小于10%。
C1 C2 C3
批內變異系數7.5% 7.23% 3.25%
批內變異系數均小于10%。
批間變異系數:指不同濃度的三個樣品C1、C2、C3 在多次測定間的重復性，應小于15%。
C1 C2 C3
批間變異系數12% 6.7% 3.15%
批間變異系數均小于15%。
3、測定范圍：
采用零標準品添加高濃度的Ins,確定本試劑盒的測定范圍為0～350 mIU/ml
4、正常參考值
4.0-16.8mIU/L
建議各實驗室應建立本實驗室的正常值，以上數據僅供參考。
[規(guī)格] 50 人份／盒、100 人份／盒
[儲藏]冷凍組份-20℃,冷藏組份2～8℃。
[有效期] 1 個月