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            上海信帆生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第13年

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            抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

            參  考  價(jià):50 - 500 /件
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            • 型號(hào)

            • 品牌

              信帆生物

            • 廠商性質(zhì)

              生產(chǎn)商

            • 所在地

              上海市

            更新時(shí)間:2025-02-18 14:41:17瀏覽次數(shù):878次

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            抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)
            服務(wù)介紹:TRAP染色,即抗酒石酸酸性磷酸酶染色, 是一種羰基化的含金屬蛋白酶,在破骨細(xì)胞和破軟骨細(xì)胞中高表達(dá),為破骨細(xì)胞的標(biāo)志酶,在活化的巨噬細(xì)胞和神經(jīng)元中也有一定的表達(dá)。TRAP在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖和分化等方面均具有重要作用,也與活性氧的產(chǎn)生以及鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。破骨細(xì)胞中TRAP主要分布于胞漿,目前,TRAP染色主要用于鑒定破骨細(xì)胞的存在狀

            抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)


            服務(wù)介紹:TRAP染色,即抗酒石酸酸性磷酸酶染色, 是一種羰基化的含金屬蛋白酶,在破骨細(xì)胞和破軟骨細(xì)胞中高表達(dá),為破骨細(xì)胞的標(biāo)志酶,在活化的巨噬細(xì)胞和神經(jīng)元中也有一定的表達(dá)。TRAP在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖和分化等方面均具有重要作用,也與活性氧的產(chǎn)生以及鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。破骨細(xì)胞中TRAP主要分布于胞漿,目前,TRAP染色主要用于鑒定破骨細(xì)胞的存在狀態(tài)。
            檢測(cè)原理:
            TRAP
            是破骨細(xì)胞的特異性標(biāo)志酶,能夠在酸性環(huán)境中水解磷酸酯。在含有酒石酸的酸性條件下,TRAP能夠水解萘酚AS-BI磷酸酯,生成的萘酚AS-BI與顯色劑(如偶氮副品紅、fast red或六唑-副玫瑰苯胺等)結(jié)合,形成不溶于水的紅色沉淀。這一反應(yīng)僅在破骨細(xì)胞中發(fā)生,因此可以通過顯微鏡觀察到特定細(xì)胞的紅色顆粒,從而實(shí)現(xiàn)定位。
            實(shí)驗(yàn)步驟:
            1
            、樣本準(zhǔn)備:準(zhǔn)備骨組織的石蠟切片、冰凍切片或培養(yǎng)的破骨細(xì)胞。樣本的制備質(zhì)量直接影響染色效果,因此應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行。
            2
            、固定與清洗:使用適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ海ㄈ?/span>4%的多聚甲醛)固定樣本,然后用PBS緩沖液清洗,以去除殘留的固定液和雜質(zhì)。
            3
            、染色液配制:按照一定比例和順序配制TRAP染色工作液。注意,染色液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存導(dǎo)致成分分解影響染色效果。
            4
            、染色:將配制好的染色液倒入染色缸中,水浴加熱至適當(dāng)溫度(通常為37℃)。將樣本放入染色缸中,避光孵育一定時(shí)間(如45-60分鐘)。孵育時(shí)間應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜆颖绢愋瓦M(jìn)行調(diào)整。
            5
            、復(fù)染:使用蘇木染色液或甲基綠染色液對(duì)樣本進(jìn)行復(fù)染,以增強(qiáng)細(xì)胞核的對(duì)比度。復(fù)染時(shí)間也應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行調(diào)整。
            6
            、后處理:染色后的樣本需要用去離子水清洗,以去除未反應(yīng)的染色液。然后依次經(jīng)過脫水、透明和封片等步驟處理。
            注意事項(xiàng):
            1
            、實(shí)驗(yàn)條件控制:TRAP染色通常在37℃下進(jìn)行,以保證酶活性的最佳狀態(tài)。過高或過低的溫度都可能導(dǎo)致酶活性下降,影響染色效果。
            2
            、染色時(shí)間把握:染色時(shí)間是影響TRAP染色結(jié)果準(zhǔn)確性的重要因素。過短的染色時(shí)間可能導(dǎo)致染色不充分,而過長(zhǎng)的染色時(shí)間則可能導(dǎo)致背景染色增加,影響結(jié)果的判讀。
            3
            、染色液避光保存:TRAP染色液中的某些成分對(duì)光敏感,容易在光照下分解。


            抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)



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