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            上海信帆生物科技有限公司
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            信帆生物提供:凝膠遷移(EMSA)檢測服務(wù)

            參  考  價:200 - 800 / 平米
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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              其他品牌

            • 廠商性質(zhì)

              生產(chǎn)商

            • 所在地

              上海市

            更新時間:2025-02-14 10:50:53瀏覽次數(shù):1283次

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            信帆生物提供:凝膠遷移(EMSA)檢測服務(wù)

            服務(wù)介紹:EMSA也稱為凝膠遷移實驗或凝膠阻滯實驗,是一種用于研究蛋白質(zhì)與核酸(DNA或RNA)相互作用的分子生物學(xué)技術(shù)。通過該實驗,可以檢測蛋白質(zhì)是否與特定的核酸序列結(jié)合,并分析結(jié)合的特異性、親和力等。

            信帆生物提供:凝膠遷移(EMSA)檢測服務(wù)

            服務(wù)介紹:EMSA也稱為凝膠遷移實驗或凝膠阻滯實驗,是一種用于研究蛋白質(zhì)與核酸(DNARNA)相互作用的分子生物學(xué)技術(shù)。通過該實驗,可以檢測蛋白質(zhì)是否與特定的核酸序列結(jié)合,并分析結(jié)合的特異性、親和力等。
            檢測原理:
            EMSA
            基于核酸-蛋白質(zhì)復(fù)合物在電場中的遷移率與未結(jié)合核酸的蛋白質(zhì)或核酸單體不同的原理。當(dāng)特定的DNARNA片段(通常稱為探針)與待測的蛋白質(zhì)樣品混合并孵育時,如果蛋白質(zhì)能夠與探針結(jié)合,就會形成核酸-蛋白質(zhì)復(fù)合物。這種復(fù)合物由于分子量較大,在電場中的遷移速度會比未結(jié)合的核酸或蛋白質(zhì)慢。通過比較電泳后形成的條帶位置,可以判斷蛋白質(zhì)是否與核酸結(jié)合,以及結(jié)合的程度。
            實驗步驟:
            通常將純化的蛋白和細(xì)胞粗提液和32P同位素標(biāo)記的DNARNA探針一同保溫,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針。DNA-復(fù)合物或RNA-復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動得慢。同位素標(biāo)記的探針依研究的結(jié)合蛋白的不同,可是雙鏈或者是單鏈。當(dāng)檢測 如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的DNA結(jié)合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白,或核細(xì)胞抽提液。在檢測RNA結(jié)合蛋白時,依據(jù)目的RNA結(jié)合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用核或胞質(zhì)細(xì)胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結(jié)合序列的DNARNA片段和寡核苷酸片段(特異), 和其它非相關(guān)的片段(非特異),來確定DNARNA結(jié)合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下,依據(jù)復(fù)合物的特點和強度來確定特異結(jié)合。
            注意事項:
            1
            、探針設(shè)計:探針的長度、序列和標(biāo)記方法都需要仔細(xì)考慮,以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
            2
            、實驗條件:實驗條件(如溫度、pH值、離子強度等)對實驗結(jié)果有很大影響,需要嚴(yán)格控制。
            3
            、結(jié)果分析:在分析結(jié)果時,需要注意區(qū)分非特異性結(jié)合和特異性結(jié)合,以及考慮可能的競爭性和抑制作用。

            僅供科研實驗用,不做其他用途!

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