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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2024-10-26 15:23:45瀏覽次數(shù):826次
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尼氏染色實(shí)驗(yàn)代測
尼氏染色原理:
神經(jīng)元細(xì)胞體包括一個(gè)具有皺褶核膜的大細(xì)胞核、稀疏的染色質(zhì)和一個(gè)明顯的核仁。在細(xì)胞體中細(xì)胞質(zhì)是尼氏顆粒,即能夠代表粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點(diǎn)狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆??梢杂煤芏嗳旧珌盹@示如中性紅、亞甲基藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時(shí)間使一些染色既可以僅突出尼氏物質(zhì),也可以顯示神經(jīng)元的細(xì)胞核和神經(jīng)膠質(zhì)。各種神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都含有尼氏體,但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會(huì)因?yàn)樯頎顟B(tài)的變化而變化,尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)蛋白質(zhì)合成的重要部位,當(dāng)神經(jīng)元受到刺激后,胞體內(nèi)的尼氏體會(huì)明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞-甲藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色。
尼氏染色說明:
1、細(xì)胞可做染色,貼壁細(xì)胞做爬片后染色,懸浮細(xì)胞做滴片后染色。
2、拍照倍數(shù)分100倍,200倍,400倍。正常情況下拍照是200倍3張,400倍3張。
3、全景掃描可看任意倍數(shù)。
實(shí)驗(yàn)操作步驟(僅供參考)
1、常規(guī)脫蠟至水(二甲苯I、二甲苯II各15min,然后梯度酒精脫水:100%I、100%II、95%、90%、80%、70%、50%各5min)
2、蒸餾水沖洗3次,每次5min
3、然后置于60℃溫箱用1%甲苯胺藍(lán)染色40 min(或用焦油紫染色30s)
4、蒸餾水洗凈染料后,于分別置于70%,80%和95%以及100%乙醇中脫水,再用二甲苯透明
5、后用中性樹膠封片。
尼氏染色實(shí)驗(yàn)代測
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