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            Chondrex 快速膠原酶活性檢測試劑盒

            閱讀:1894      發(fā)布時間:2019-7-5
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            Chondrex 快速膠原酶活性檢測試劑盒(Collagenase Assay Kits

            背景描述:

            膠原酶(Collagenases),基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)家族的成員之一,屬于內(nèi)肽酶類,在三螺旋區(qū)降解天然膠原,參與結(jié)蹄組織的生理和病理周轉(zhuǎn)過程。膠原是動物基質(zhì)結(jié)蹄組織的主要纖維成分。膠原酶可能在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的多個階段中,對腫瘤細(xì)胞侵襲穿透細(xì)胞外基質(zhì)的過程起到促進(jìn)作用。膠原酶已被支持用于臨床治療杜普征氏掌攣縮(Dupuytren's contracture),佩羅尼氏?。≒eyronie's disease)和傷口愈合。

            膠原酶活性檢測方法很多,傳統(tǒng)的方法包括膠原酶譜法(Collagen Zymography),該法首先將樣本加入含膠原的SDS-PAGE凝膠中電泳,然后在適當(dāng)緩沖液中復(fù)性12-16h,后染色。當(dāng)?shù)孜锉幻附到?,在整個黑色的背景中能看到清晰透明的降解條帶,從而來判斷是否存在膠原酶活性。該方法不僅費力費時,且很可能因復(fù)性不*逆轉(zhuǎn),導(dǎo)致酶活性降低,結(jié)果出現(xiàn)較大偏差。

            Rapid Collagenase Assay Kit (I) and (II)(Chondrex, Inc)

            1. 試劑盒優(yōu)勢

            含有測定膠原酶活性的所有必要成分包括重組人MMP-8(用作對照)和兩種類型的膠原酶活化劑。

            不同于抗體為基礎(chǔ)的ELISA試劑盒僅能檢測酶蛋白的存在,這些試劑盒目的在于測定酶活性。

            試劑盒使用FITC標(biāo)記的可溶性牛I型膠原或II型膠原為底物,只需2h就能完成測試。

            比底物凝膠分析法(酶譜法)快10倍,檢測靈敏度比放射同位素標(biāo)記膠原法更靈敏。

            2. 特異性

            哺乳動物膠原酶

            4. 反應(yīng)步驟

            5. 試劑盒組分

            組分名稱

            數(shù)量

            規(guī)格

            保存

            Reference-recombinant Human MMP-8

            1 vial

            25µl, 100 units/ml

            -80℃

            Solution A-FITC-Collagen Dilution buffer

            1 bottle

            10ml

            4℃

            Solution B-Sample dilution and reaction buffer  

            1 bottle      

            50ml

            4℃

            FITC-collagen

            1 bottle

            10ml, 1mg/ml in 0.01M acetic acid  

            -20℃        

            Activator 1-20X APMA

            1 vial

            1ml

            RT

            Activator 2-Trypsin

            1 vial

            1mg lyophilized

            -20℃

            Proteinase Inhibitor

            1 vial

            3mg lyophilized

            -20℃

            Enhancer-Elastase

            1 vial

            1mg lyophilized

            -20℃

            Stop solution-o-phenanthroline

            1 vial

            1ml 10mM in ethanol

            RT

            Extraction buffer

            2 bottles

            25ml

            RT

            ELISA plate black

            2 each

            96 well

            RT

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