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            小鼠腎炎模型誘導(dǎo)方案

            閱讀:704      發(fā)布時間:2024-8-5
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            小鼠腎炎模型誘導(dǎo)方案

            免疫復(fù)合物腎小球腎炎(IGGN)模型簡介:

            腎小球腎炎是指一系列由免疫應(yīng)答介導(dǎo)的導(dǎo)致腎小球炎癥。膜性腎病和膜性腎小球腎炎是人類腎病綜合征最常見的病因。膜性腎病的特征是由免疫復(fù)合物沿著基底膜與內(nèi)皮細胞之間的間隙沉積,導(dǎo)致基底膜增厚激活補體。激活的炎癥級聯(lián)導(dǎo)致腎功能受損,包括蛋白尿和腎功能衰竭。有研究報道用大鼠膜性腎病模型(Heymann腎炎),研究人膜性腎病,盡管Heymann腎炎覆蓋了人膜性腎炎的很多方面,但是使用大鼠作模型有很多缺點。小鼠膜性腎炎模型是研究膜性腎病發(fā)病機制和開發(fā)靶向治療的重要研究工具。Wayne et al.等研究用cBSA可誘導(dǎo)兔膜性腎病癥狀。另外,已有研究用cBSA在狗、貓、兔等動物成功誘導(dǎo)免疫復(fù)合物腎小球腎炎模型。Chen et al,將這一模型用于小鼠,稱為:免疫復(fù)合物腎小球腎炎(IGGN)模型。

            人的膜性腎病是由免疫復(fù)合物沿著基底膜與內(nèi)皮細胞之間的間隙沉積而引起的。沉積的免疫復(fù)合物激活補體,導(dǎo)致基底膜變厚。對于小鼠ICGN模型,用cBSA反復(fù)免疫小鼠。帶正電荷的cBSA與帶負電荷的基底膜(GBM)結(jié)合???/span>cBSA抗體(主要是IgG1)與cBSA產(chǎn)生的免疫復(fù)合物,導(dǎo)致人膜性腎病出現(xiàn)多種癥狀,如:基底膜增厚,低蛋白血癥和蛋白尿。這種發(fā)病機制,同樣適用在兒童膜性腎病。

            操作流程:

            動物品系:

            Balb/c and ICR小鼠(≥7-8周齡,雄性或雌性都可以),C57BL/6小鼠不能誘導(dǎo)產(chǎn)生該模型。

            乳劑制備:

            cBSA和CFA弗氏佐劑(cat#7008, 1mg/ml)等體積混合

            注意:

            制備乳劑后請檢測乳劑質(zhì)量,滴一滴到水中不擴散,說明乳劑質(zhì)量良好,反之,重新混勻,直到為油包水狀態(tài)。

            免疫方法

            小鼠尾根部皮下免疫100ul乳劑(cBSA 0.1mg

            腎炎誘導(dǎo)

            2周后,靜脈注射200ul(400ug) cBSA(2 mg/ml),每隔一天重復(fù)免疫,一共免疫5次。

            注意

            靜脈注射cBSA,導(dǎo)致小鼠過敏反應(yīng),有可能會導(dǎo)致小鼠死亡。為了避免這種情況發(fā)生,初次免疫劑量要小一些(50-100ug cBSA,在隨后的2-5次免疫逐漸增加劑量到400ug

            腎炎評估:

            通過檢測小鼠16小時尿中尿蛋白含量評價腎炎嚴重程度。推薦使用chondrex 公司小鼠白蛋白檢測試劑盒(cat#3012

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            中文名稱

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            9058

            陽離子牛血清白蛋白

            Cationic Bovine   Serum Albumin (cBSA)

            20mg

            7008

            CFA弗氏佐劑

            CFA1mg/ml

            5ml

            3012

            小鼠白蛋白檢測試劑盒

            Mouse Albumin   Detection Kit

            1Kit


             




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