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低速離心機制備細胞膜試驗步驟
閱讀：2475 發(fā)布時間：2015-9-15
低速離心機廣泛適用于樣品量少、步驟多、離心力大、溫度要求不高的實驗。如：生物化學(xué)、遺傳工程、農(nóng)林學(xué)科、食品衛(wèi)生、醫(yī)院和其它科研單位實驗室對樣品的分離。
低速離心機產(chǎn)品特點：
1、TFT真彩大屏幕觸控液晶顯示，智能化控制，可觸摸/按鍵兩種操作模式同時控制。
2、采用大力矩?zé)o刷變頻電機驅(qū)動，特殊組合減震裝置，使電機平穩(wěn)運行。
3、運行參數(shù)自動記錄，可RCF直接啟動。
4、設(shè)有三層鋼套保護、運行安全可靠。
5、可提供20種工作模式選擇，可自由編程、調(diào)用。
6、點動功能，短暫離心。
7、10檔加速/減速速率控制
低速離心機制備細胞膜的分離實驗：
試劑：生理鹽水，0.25mol/L 蔗糖溶液（含0.3mol/LCacl2），0.34mol/L 蔗糖溶液（含0.3mol/LCacl2）；器件：常規(guī)的分離細胞膜的。
1）取空腹12h雄鼠（150g),斷頭處死，放血。解剖取肝臟，迅速用生理鹽水洗凈，用濾紙吸干。取3g肝臟剪碎，經(jīng)冷的0.25mol/L 蔗糖溶液洗滌數(shù)次，加18ml預(yù)冷0.25mol/L 蔗糖溶液勻漿，用雙層尼龍膜過濾，備用。
2）將勻漿的放入離心管中，沿壁小心加入等體積的0.34mol/L 蔗糖溶液覆蓋于樣品上，以700g離心10min.
3）將離心沉淀以0.25mol/L 蔗糖溶液洗滌， 1000g（3500r/min）離心10min，重復(fù)一次。
4）離心后沉淀為細胞核，其上有一較疏松的上層，小心吸出此上層，懸于密度d20為1.16的蔗糖溶液（51g/L)中，移入離心管，沿壁加密度d20為1.18的蔗糖溶液（51.5g），覆蓋在樣品層上層。700g（3000r/min）離心10min，細胞膜組分位于兩層溶液界面，小心吸出，置低溫保存，以備進一步分析。