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酶聯(lián)免疫檢測的幾種方法及其原理
閱讀：1669 發(fā)布時間：2022-7-22
（1）酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）：是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行?？捎瞄g接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。
?。?）夾心法（sandwichassay）:將已知的特異抗體包裝在固相載體（塑料板凹孔或紙片上），加入待檢標本，標本中的抗原即可與載體上的抗原結(jié)合，洗去未結(jié)合的材料后加入該抗原的酶標記抗體，洗去未結(jié)合的酶標抗體，加底物顯色，用酶免疫檢測儀測量顏色的光密度，可定量測定抗原。
間接法（indirecrELISA）常用于檢查特異抗體。先將已知特異抗原包被固相載體，加入待檢標本（可能含有相應抗體），再加入酶標抗Ig的抗全（即第二抗體），經(jīng)加底物顯色后，根據(jù)顏色的光密度計算出標本中抗體的含量。
?。?）BAS-ELISA：近年來對酶免設分析法的改進是使用生物素-親合素-過氧化物酶復合物作為指示劑，組成一新的生物放大系統(tǒng)進一步提高檢測的敏感度?？捎脕頇z測多種抗原抗體系統(tǒng)如細菌、病毒、腫瘤細胞表面抗原等。一個親合素（avidin）分子可以結(jié)合4個生物素分子（biotin）。結(jié)合非常穩(wěn)定。親合素和生物素都可與抗全、酶、熒光素等分子結(jié)合，而不影響后者的生物活性。一個抗體分子可偶聯(lián)90個生物素分子，通過生物素又可連接多個親合素。因此大提高檢測的敏感度。目前應用生物-酶標親合素系統(tǒng)（biotinavidinsystem-ELISA,BAS-ELISA），它是通過生物素標記抗體連接免疫反應系統(tǒng)，同時借助生物素化酶或酶標親合素引入酶與底物反應系統(tǒng)。