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超微量分光光度計的原理及使用方法介紹
閱讀：1952 發(fā)布時間：2023-3-6
超微量分光光度計是一種應(yīng)用于分析和檢測微小分子濃度的儀器，主要用于分析和檢測生物分子和化學(xué)分子的含量和質(zhì)量。其工作原理基于分子吸收不同波長光線的能力，通過光線通過樣品引起的吸收程度來確定溶液的濃度。以下將詳細(xì)介紹其工作原理和使用方法。
一、工作原理
1.光源：超微量分光光度計使用的是可見光和紫外線的光源，普遍采用鹵素?zé)?，陽極氧化鋁、聚酰亞胺和鎢激發(fā)燈等。
2.分光儀：分光儀通過將可見光和紫外線分解為不同的波長，根據(jù)不同波長的吸收情況來分析樣品的濃度。分光儀使用的是一組設(shè)計好的光柵來分離光線，每個光柵能夠分離一定范圍內(nèi)的波長。
3.樣品池：樣品池是在分光儀中放置樣品的地方，通常采用石英或玻璃材質(zhì)制成。
4.探測器：探測器是最重要的裝置之一，負(fù)責(zé)接受樣品池中吸收或透射的光，并將其轉(zhuǎn)化為電信號。探測器通常采用光電二極管或光電multiplier管。
二、使用方法
1.校準(zhǔn)超微量分光光度計：在使用前，需要對光度計進(jìn)行校準(zhǔn)，以確保其讀數(shù)準(zhǔn)確。校準(zhǔn)過程中，需要使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，使用前需要將樣品池清洗干凈，在樣品池中加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)置波長，記錄吸收測量值，并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
2.準(zhǔn)備樣品：將待測樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲校瑢⑷芤悍湃霛崈舻臉悠烦刂?。注意，樣品?yīng)該盡可能稀釋，以提高精度。
3.設(shè)置波長：選擇波長，將分光儀設(shè)置為樣品溶液所吸收的波長。
4.吸收測量：將樣品池放入分光光度計中，使其測量樣品的吸收值。在吸收測量過程中，要避免任何突然的振動，以及其他外來因素的影響，如電磁干擾等。
5.數(shù)據(jù)分析：將數(shù)據(jù)整理到工作文檔中，進(jìn)行進(jìn)一步的比較和分析。