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            ProteanFect和Lipo系列轉(zhuǎn)染試劑的區(qū)別,怎么選擇?

            閱讀:585      發(fā)布時(shí)間:2025-1-15
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            ProteanFect和陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(Lipo)是兩種常用的轉(zhuǎn)染技術(shù),它們?cè)趯?shí)驗(yàn)原理、操作步驟和適用范圍上存在一些區(qū)別。

            實(shí)驗(yàn)原理

            Lipo轉(zhuǎn)染
            • 利用帶正電的陽離子脂質(zhì)體與帶負(fù)電的DNA通過靜電作用力結(jié)合形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物。
            • 復(fù)合物被細(xì)胞膜表面吸附后通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,在內(nèi)涵體內(nèi)釋放,可能通過膜融合或內(nèi)吞體破裂等方式將DNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中。
            • 最終DNA通過細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核,實(shí)現(xiàn)外源基因的表達(dá)。
            ProteanFect轉(zhuǎn)染
            • 核酸藥物與內(nèi)源蛋白自動(dòng)組裝形成ProteanFect-核酸復(fù)合物。
            • 細(xì)胞主動(dòng)攝入ProteanFect-核酸復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞,核酸分子釋放,內(nèi)源蛋白被內(nèi)在降解途徑降解。
            • 外源基因表達(dá)。

            操作步驟

            Lipo轉(zhuǎn)染
            1. 將核酸與Lipofection Reagent混合形成復(fù)合物。
            2. 將復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)體系中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
            3. 經(jīng)過12-72小時(shí)后進(jìn)行基因表達(dá)檢測(cè)。
            ProteanFect轉(zhuǎn)染
            1. 制備ProteanFect轉(zhuǎn)染體系。
            2. 將ProteanFect轉(zhuǎn)染體系加入待轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
            3. 根據(jù)細(xì)胞類型孵育15-120分鐘,最快可在結(jié)束反應(yīng)1小時(shí)后觀察到目的基因的表達(dá)。

            適用范圍

            Lipo轉(zhuǎn)染
            • 不適用于難轉(zhuǎn)細(xì)胞系和原代細(xì)胞,因?yàn)檫@些細(xì)胞可能對(duì)Lipo轉(zhuǎn)染產(chǎn)生較大毒性,轉(zhuǎn)染效率低,且對(duì)培養(yǎng)條件有特殊要求。
            ProteanFect轉(zhuǎn)染
            • 適用于多種細(xì)胞系,包括難轉(zhuǎn)細(xì)胞系和原代細(xì)胞,因?yàn)镻roteanFect具有高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性,且操作簡(jiǎn)便。

            企業(yè)介紹

            華雅思創(chuàng)生物®專注于提供CGT、分子診斷和先進(jìn)醫(yī)療的生物試劑和醫(yī)療耗材產(chǎn)品,服務(wù)客戶遍及細(xì)胞治療、疫苗抗體、醫(yī)療診斷、腦科學(xué)、合成生物、長(zhǎng)壽研究和醫(yī)美保健等領(lǐng)域。"買試劑,找華雅",華雅思創(chuàng)生物®憑借深厚的技術(shù)實(shí)力和嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,已成為眾多科研機(jī)構(gòu)和生物制藥企業(yè)的首·選供應(yīng)商。


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