流動(dòng)相就是載體,將物質(zhì)帶到固定相里并通過固定相的流體。流動(dòng)相可以是緩沖液與有機(jī)溶劑結(jié)合的水-有機(jī)混合物，也可以是有機(jī)-有機(jī)混合物。
開始使用流動(dòng)相溶劑進(jìn)行色譜分析前，一定要檢查溶劑是否*混溶，這是非常重要的，其次是要關(guān)注它們?cè)诨旌蠒r(shí)是否會(huì)相互反應(yīng)，如果發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，會(huì)影響流動(dòng)相的使用和色譜的正確分析。
有些色譜工作者可能會(huì)說，那我采用HPLC級(jí)溶劑可以直接使用嗎？即使是HPLC級(jí)溶劑也要在使用前進(jìn)行過濾！為什么呢？主要是有些懸浮顆?；螂s質(zhì)是細(xì)微米的，人的肉眼是無法觀測(cè)到的，我們不能判斷一個(gè)清澈的溶劑就一定“*干凈”。就好比我們使用自來水，也看著很干凈是不是？但是其實(shí)里面包含很多其它的不溶物質(zhì)等。如果你在進(jìn)行色譜分析時(shí)不將懸浮顆粒和雜質(zhì)去除，會(huì)影響HPLC系統(tǒng)的性能。不僅如此，因?yàn)樯V柱是多孔結(jié)構(gòu)，顆粒物很可能將色譜柱堵塞，背壓升高，影響流速甚至損壞泵，因?yàn)橐粫r(shí)的圖方便而造成了色譜柱損壞就得不償失了。
說完了過濾，現(xiàn)在又來說脫氣。我們都知道液相色譜系統(tǒng)里是超高壓運(yùn)作的，若流動(dòng)相中所含的空氣不除去，則流動(dòng)相通過色譜柱時(shí)其中的氣泡受到壓力而壓縮，流出柱子進(jìn)入檢測(cè)器時(shí)因常壓而將氣泡釋放出來，會(huì)造成檢測(cè)器噪聲增大，使基線不穩(wěn)，最終導(dǎo)致儀器不能正常工作，特別是梯度洗脫時(shí)特別明顯。
如何大程度地減少此類情況的發(fā)生呢？
流動(dòng)相使用前一定要用過濾器過濾，這是非常重要的！溶劑入口過濾頭可有效濾除流動(dòng)相中的固體顆粒雜質(zhì)；未經(jīng)過濾的溶劑或溶劑瓶中生長(zhǎng)的微生物都會(huì)降低溶劑入口過濾頭的壽命和泵的性能，因此，需要定期清洗或更換溶劑入口濾頭。溶劑入口過濾頭由高品質(zhì)316L不銹鋼制成，耐腐蝕，適用于大部分溶劑。濾頭頂端階梯式連接出口可分別于1.5mm，2.2mm，3.5mm內(nèi)徑的管路連接?？钍叫吞?hào)多種，可供選擇。
使用前新鮮準(zhǔn)備流動(dòng)相。最好每次分析前新調(diào)配流動(dòng)相，不要讓流動(dòng)相過夜或者長(zhǎng)時(shí)間存放。這樣很容易滋養(yǎng)微生物等。
在色譜柱前添加使用保護(hù)柱進(jìn)行過濾，避免色譜柱堵塞。液相色譜保護(hù)柱能將那些強(qiáng)保留的、不可吸附的化合物截留下來。樣品和流動(dòng)相的過濾可以維護(hù)保護(hù)柱對(duì)化學(xué)污染物的吸附容量，能夠更長(zhǎng)時(shí)間的維護(hù)柱效，保護(hù)色譜柱免受污染物的危害，在額定背壓值內(nèi)和在高流速中仍保持穩(wěn)定、無滲漏。
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