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如果流動(dòng)相均由液相色譜儀級(jí)溶劑組成,流動(dòng)相沒有必要過濾。這是因?yàn)楦咝б合嗌V級(jí)的有機(jī)溶劑,例如乙腈、甲醇等,在制造的工藝過程中都已經(jīng)過了0.2μm微孔濾膜過濾。同樣,無論你是買的HPLC級(jí)的水還是在實(shí)驗(yàn)室使用超純水凈化系統(tǒng)制備的水,最后一步也是通過0.2μm微孔濾膜,然而,如果有任何一種緩沖液中加入了固體物,例如,磷酸鹽,流動(dòng)相過濾將是必要的一個(gè)步驟。
液相色譜儀雖然緩沖鹽可能是可溶解的、高純的,但它還是可能含有顆粒物質(zhì),例如在蓋試劑瓶的塑料內(nèi)蓋時(shí),塑料瓶蓋子與瓶口邊緣擠壓就會(huì)產(chǎn)生塑料顆粒。在這種情況下,添加的一種固體物可能*溶解了,但是少量雜質(zhì)顆粒存在于流動(dòng)相中成為殘?jiān)?。流?dòng)相通過0.45μm微孔濾膜過濾對(duì)于從流動(dòng)相中除去所有顆粒物是一個(gè)有效方法。0.2μm微孔濾膜也可以用,但是它們就這個(gè)應(yīng)用而言并不比0.45μm微孔濾膜更有效,而且它的過濾速度會(huì)更慢,特別是當(dāng)實(shí)驗(yàn)室使用的試劑和水的質(zhì)量不太好時(shí)。
建議實(shí)驗(yàn)室在編寫液相色譜儀制定他們流動(dòng)相制備標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOPs)時(shí)規(guī)定,可以借鑒國(guó)際上同類實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定,即:流動(dòng)相制備僅采用HPLC級(jí)液體時(shí)不需要過濾,反之所有流動(dòng)相組成在使用前必須過濾。在連接儲(chǔ)液瓶和泵的輸液管的末端入口采用下沉式過濾器(常見材質(zhì)有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種)也是很重要的。這個(gè)過濾器的規(guī)格為≥10μm的微孔物質(zhì),所以,它不能取代流動(dòng)相過濾步驟,但是它能除去系統(tǒng)中的塵土并保證儲(chǔ)液瓶、輸液管使用的可靠性。
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