和其它分析儀器一樣，若想讓高效液相色譜儀很好地為你工作，首先要保養(yǎng)好它，總結(jié)保養(yǎng)的三要點(diǎn)：脫氣、過(guò)濾和沖洗。

一、脫氣

流動(dòng)相脫氣對(duì)于避免HPLC系統(tǒng)出問(wèn)題、順利得到一個(gè)理想的數(shù)據(jù)是一個(gè)很有效的措施。常用的脫氣方法有如下幾種：

1、吹氦脫氣法：

利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa壓力下，以約60 mL/min流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器中10～15min，可以很有效地從流動(dòng)相中排除溶解的空氣，能排除接近80%的氧氣。

2、加熱回流法：

此法的脫氣效果較好。在操作時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會(huì)丟失，混合流動(dòng)相的比例會(huì)有變化。

3、抽真空脫氣法：

此法可使用真空泵，降壓至0.05～0.07MPa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會(huì)使混合溶劑組成發(fā)生變化，從而影響到實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性，因此多用于單溶劑體系的簡(jiǎn)單分析。

4、在線脫氣法：

現(xiàn)在商品的HPLC儀器，均可配在線脫氣機(jī)，在線脫氣使用簡(jiǎn)單，低故障，有效。

二、過(guò)濾

任何顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng)后都會(huì)在柱子入口端被篩板擋住，最后的結(jié)果是將柱子堵塞，表現(xiàn)出的特征是系統(tǒng)壓力增加并使色譜峰變形。因此，要采取各種預(yù)防措施，努力防止或減少顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng)中，從而延長(zhǎng)儀器和色譜柱的使用壽命，并提高數(shù)據(jù)的可靠性。

三、沖洗

使HPLC系統(tǒng)良好運(yùn)行的第三個(gè)要點(diǎn)是保持系統(tǒng)的清潔。以下幾個(gè)部位需要經(jīng)常沖洗。

1、流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶

首先要經(jīng)常清洗流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶，或者每做一批新樣品更換一次流動(dòng)相。一個(gè)臟的儲(chǔ)液瓶將會(huì)污染注入的流動(dòng)相。建議儲(chǔ)液瓶中緩沖液使用時(shí)間不要超過(guò)一周，而有機(jī)溶劑使用時(shí)間不要超過(guò)一個(gè)月。

2、泵

接下來(lái)要沖洗的是泵。千萬(wàn)不要一分析完沖幾分鐘后就停泵，在停泵以前一定要用非緩沖液流動(dòng)相沖洗泵在半個(gè)小時(shí)以上，要是流動(dòng)相中有難揮發(fā)緩沖鹽則建議沖洗的時(shí)間應(yīng)該更長(zhǎng)些。

3、自動(dòng)進(jìn)樣器

自動(dòng)凈樣器也要按規(guī)定清洗。現(xiàn)在的儀器多配有自動(dòng)進(jìn)樣器的沖洗液瓶，通常只要注意及時(shí)更換、補(bǔ)充沖洗液即可。

4、色譜柱

對(duì)柱子的污染是隨使用時(shí)間而增加。用梯度沖洗效果更好，具體的比例要根據(jù)柱子的說(shuō)明書(shū)和性質(zhì)而定。

5、檢測(cè)器

如果是正常使用，檢測(cè)器將依據(jù)其性質(zhì)并按照說(shuō)明書(shū)規(guī)定進(jìn)行洗。