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小鼠腦立體實(shí)驗(yàn)時(shí)如何驗(yàn)證靶位是否準(zhǔn)確？
小鼠腦立體實(shí)驗(yàn)時(shí)驗(yàn)證靶位是否準(zhǔn)確步驟:
當(dāng)注射完染液后,移走微量注射器,但仍以耳棒和切牙鉤三點(diǎn)固定鼠顱,不從立體定向儀上卸下來(lái)。用大剪刀于枕骨大孔處斷頭，再用骨鉗掀開(kāi)枕骨、頂骨,暴露小腦，從小腦開(kāi)始向前移行，邊滴注4%的多聚甲醛固定液,邊用剃須刀刀片垂直切下腦組織(未固定的鼠腦組織軟如豆腐狀，未經(jīng)固定劑固定不能切取成片的腦組織)。滴注甲醛液，使腦組織固定，須較長(zhǎng)的時(shí)間(12 h以上),不可急于求成,應(yīng)分多次隨切隨滴,逐漸向著靶.位平面滴注甲醛液、呈片狀切取腦組織,直至暴露針道。注意要使所切的腦組織切面垂直、平滑,待一步步切到靶位時(shí)，對(duì)照?qǐng)D譜檢查靶位是否準(zhǔn)確。觀察靶點(diǎn)和針道與靶位坐標(biāo)之間的差異,分別修正AP、L.V三軸數(shù)值(在無(wú)針道偏斜的情況下)為下次打靶提供修正后的坐標(biāo)。