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更新時間：2025-03-19 10:52:27瀏覽次數(shù)：73
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| I. Background | |
| 氧化應(yīng)激在細(xì)胞內(nèi)促氧化和抗氧化過程的平衡中起著重要作用。它涉及不同的人類疾 病，如慢性阻塞性肺疾?。–OPD）、帕金森?。≒D）、阿爾茨海默?。ˋD）、癌癥和糖尿 病。Nrf2（核因子 E2 相關(guān)因子 2）是調(diào)控細(xì)胞氧化應(yīng)激防御系統(tǒng)的核心轉(zhuǎn)錄因子，通過結(jié) 合抗氧化反應(yīng)元件（ARE）激活下游基因表達(dá)，維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡、解毒及抗炎， 其信號通路在癌癥、神經(jīng)退行性疾病及代謝紊亂中具有關(guān)鍵作用。大量證據(jù)表明，激活 Nrf2 通路可減少氧化應(yīng)激引起的炎癥損傷，抑制早期腫瘤的發(fā)生。因此，Nrf2 激活劑為肺 損傷、肝損傷、腎損傷、COPD、PD 和 AD 等炎癥性疾病提供了一種治療選擇。 Nrf2/ARE 信號通路是細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡的主要途徑。在正常生理狀態(tài)下，Nrf2 位于 細(xì)胞質(zhì)中，通過與 Keap1 結(jié)合以 Keap1-Nrf2 復(fù)合物的形式錨定在胞漿內(nèi)肌動蛋白骨架上， 并依賴 E3 泛素連接酶促進泛素介導(dǎo)的 Nrf2 降解，以維持 Nrf2 活性的基本穩(wěn)態(tài)水平。在氧 化或親電應(yīng)激條件下，Nrf2 從 Keap1 釋放并易位到細(xì)胞核，與小肌肌腱神經(jīng)纖維肉瘤 （sMAF）蛋白形成異源二聚體，并與細(xì)胞保護基因啟動子區(qū)域的 AREs 結(jié)合，觸發(fā) Nrf2 靶基因的轉(zhuǎn)錄。除了 Keap1 依賴性調(diào)控外，Nrf2 還可以通過 Neh6 結(jié)構(gòu)域被糖原合成酶激 酶 3（GSK-3）磷酸化。通過含有β-轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白重復(fù)序列的蛋白（β-TrCP）導(dǎo)致其泛素化和隨 后的蛋白酶體降解。 | |
| II. Background | |
ARE-Luc MCF7 報告基因細(xì)胞，是由 ARE 調(diào)控并表達(dá) Luc 熒光素酶報 告基因的 MCF7 細(xì)胞。Sulforaphane 是 Keap1/Nrf2/ARE 的誘導(dǎo)劑，Bardoxolone 是 NRf2 的 激活劑，原原理見下圖所示。 | |
| Figure 1. ARE-Luc MCF7 原理示意圖 | |
| III. Introduction | |
| Host Cell: | ARE-Luc |
| Expressed gene: | MCF7 |
| Stability: | 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | MEM+10% FBS+ 1% NEAA+ 1mM NaP+150 μg/ml Hygromycin B |
| Mycoplasma Testing: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Homo sapiens, human |
| Tissue: | Mammary gland, breast; derived from metastatic site: pleural effusion |
| Disease: | Breast adenocarcinoma |
| Morphology: | Epithelial-like cells growing as monolayers |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
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| Figure 2. Induction of ARE activity by Sulforaphane in ARE-Luc MCF7(C59). Induction of ARE activity by Bardoxolone in ARE-Luc MCF7(C59). | |
