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多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品名稱：多酚氧化酶測(cè)定試劑盒 （可見(jiàn)光分光光度法）
產(chǎn)品英文名：Polyphenol Oxidase (PPO) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BC0190                          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣                   產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：520
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字：多酚氧化酶測(cè)定試劑盒 

簡(jiǎn)要介紹：
PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌，后者在525nm有特征光吸收。
PPO（EC1.10.3.1）主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。

產(chǎn)品詳細(xì)描述

商品貨號(hào)：	商品品牌：	規(guī)格	基本售價(jià)：	選擇規(guī)格
BC0190-50管/24樣	Solarbio	50管/24樣	520.00元

產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 
PPO 主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元 酚氧化產(chǎn)生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。 PPO 能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌，后者在 410nm 有特征光吸收。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑： 
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容： 
提取液：液體，60ml×1 瓶，4℃保存，用前混勻；  
試劑一：液體，40ml×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體，10ml×1 瓶，4℃保存；

操作步驟：  
一、粗酶液提取：    
1. 收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每 200 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 400μl 提取液，超 聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20％，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10 分鐘， 取上清，置冰上待測(cè)。
2. 稱取約 0.2g 組織，加入 1ml 提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10 分鐘，取上清，置冰上待 測(cè)。

二、測(cè)定操作表：

冷卻后，5000g，常溫離心 10min，收集上清，用蒸餾水調(diào)零，410nm 處檢測(cè)測(cè)定管和對(duì)照管吸光度。
注意:每個(gè)測(cè)定管需要設(shè)置一個(gè)對(duì)照管,可以在不同對(duì)照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn) 行 1min 沸水浴處理

PPO活性計(jì)算：  
1、組織中 PPO 活力的計(jì)算:
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每分鐘每 mg 組織蛋白在每 ml 反應(yīng)體系中使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個(gè)酶活力單位。
PPO（U/mg prot）= V 反總×V 樣總÷V 樣÷T÷0.01×（A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷Cpr=60×（A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每分鐘每 g 組織蛋白在每 ml 反應(yīng)體系中使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個(gè)酶活 力單位。
PPO（U/g 鮮重）= V 反總×V 樣總÷V 樣÷T÷0.01×（A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷W=60×（A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷W
2、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞中 PPO 活力的計(jì)算:
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每分鐘每 mg 組織蛋白在每 ml 反應(yīng)體系中使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個(gè)酶 活力單位。
PPO（U/mg prot）= V 反總×V 樣總÷V 樣÷T÷0.01×（A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷Cpr=60×（A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷Cpr
（2）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每分鐘每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每 ml 反應(yīng)體系中使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一 個(gè)酶活力單位。
PPO（U/104 cell）= V 反總×V 樣總÷V 樣÷T÷0.01×（A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷細(xì)菌或細(xì)胞密度（104/mL） =60× （A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷細(xì)菌或細(xì)胞密度（104/mL） =60× （A 測(cè)定-A 對(duì)照）÷細(xì)菌或細(xì)胞密度（104/mL）
 V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.9mL；V 樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.15 mL；V 樣總：加入提取 液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，0.2g.

注意事項(xiàng)：
不同樣本的多酚氧化酶的反應(yīng)溫度略有差別，可在 25-37℃之間進(jìn)行調(diào)節(jié)。

相關(guān)文獻(xiàn)：
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:
《MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway》 作者:B Li, Y Ding, X Tang, G Wang, S Wu, X Li 期刊:Journal of Receptor and Signal Transduction Research. 影響因子:2.998 PMID:30396299

多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)試劑盒