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更新時間:2025-02-13 21:00:07
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品牌:Solarbio | 貨號:C8150
膠原酶Ⅱ適用于肝臟,骨,甲狀腺,心臟和唾液腺組織細(xì)胞的分離。
膠原蛋白酶 來源于溶組織梭菌
膠原酶Ⅱ可以用 TESCA buffer (50 mM TES,0.36 mM 氯化鈣,pH 7.4,37°C)配制成 1-2 mg/ml。 也可以用含鈣鎂的 PBS、含鈣鎂的 hanks 或不含血清的培養(yǎng)基配制。配完后分裝,避免反復(fù)凍融。
1 個膠原消化單位(CDU):在 pH 7.4,37℃以及鈣離子存在的條件下,以每5小時從膠原中 釋放的多肽相當(dāng)于茚三酮顯色1微摩爾亮氨酸量為一個活性單位。 1FALGPA 單位:在 pH 7.5、25℃以及鈣離子存在的條件下,一個 FALGPA 水解單位每分鐘 可水解 1.0µmol 呋喃基丙烯酰基-Leu-Gly-Pro-Ala。
膠原酶Ⅱ為粗品,用于分離脂肪細(xì)胞,也可以用于分離各種組織、腫瘤,尤其是上皮組織。外 觀為黑棕色粉末。分子量68,000到125,000,適PH為6.3-8.8。膠原酶能夠特異性結(jié)合 -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-序列中的中性氨基酸(X)和甘氨酸之間的肽鍵。該粗品是溶組織梭菌分泌的 混合酶。主要為膠原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶。其中梭菌蛋白酶是被氧化的、不活潑的酶, 組織的分離必須依靠膠原酶和中性蛋白酶兩者共同作用。
激活劑:Ca2+,每摩爾酶需要4g鈣離子激活。
抑制劑:EGTA、還原性谷胱甘肽、β-巰基乙醇、巰基乙酸鈉、8-羥基喹啉、2,2'-聯(lián)吡啶等。
底物:不同類型的膠原是其天然底物,而一些合成的多肽也可以作為其底物,比如: N-CBZ-gly-pro-gly-gly-pro-ala (Km = 0.71 mM)、N-CBZ-gly-pro-leu-gly-pro、N-(3-(2-furyl)acryloyl)- leu-gly-pro-ala(FALGPA)、4-Phenylazo benzyloxycarbonyl-pro-leu-gly-pro-D-arg、N-2,4-Dinitrophenyl- pro-gln-gly-ile-ala-gly-gln-D-arg。除此之外N-Succinyl-gly-pro-leu-glypro7-amido-4-methylcoumarin是 類膠原酶的肽酶的底物。N-(2,4-Dinitrophenyl)-proleu-gly-leu-trp-ala-D-arg 氨基酸化合物是脊椎動物 膠原酶的底物。
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