4
如何正確選擇和使用賽多利斯超濾管進行樣品處理？
賽多利斯超濾管是生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中常用的工具，用于濃縮和脫鹽蛋白質(zhì)、DNA和其他大分子溶液。正確選擇和使用超濾管對于確保實驗結(jié)果的準確性和可重復(fù)性至關(guān)重要。以下是關(guān)于如何正確選擇和使用賽多利斯超濾管進行樣品處理的一些建議：
一、選擇合適的超濾管
分子量截留(MWCO)：根據(jù)目標分子的分子量選擇合適的MWCO。例如，如果需要濃縮的蛋白質(zhì)分子量為30kDa，可以選擇MWCO為10-30kDa的超濾管，以確保目標分子被截留而較小的雜質(zhì)分子可以透過膜。
材質(zhì)：賽多利斯超濾管通常由聚醚砜(PES)或再生纖維素(RC)制成。根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)(如pH、離子強度、有機溶劑含量)選擇合適的材質(zhì)。
容量：根據(jù)需要處理的樣品量選擇合適的超濾管容量。
二、樣品處理步驟
樣品準備：確保樣品中不含有可能堵塞超濾膜的顆粒或沉淀物。必要時，可以通過離心或過濾預(yù)處理樣品。
加樣：將樣品加入超濾管的上室，注意不要超過最大容量標記。
離心：將超濾管放入離心機中，根據(jù)制造商的推薦設(shè)置離心力和時間。離心過程中，小分子和溶劑將透過膜進入下室，而大分子則被截留在上室。
濃縮/脫鹽：重復(fù)離心步驟，直到達到所需的濃縮程度或脫鹽效果。
樣品回收：使用移液器從上室中取出濃縮后的樣品。如果需要，可以用適量的緩沖液洗滌超濾管以回收更多樣品。
超濾管清洗與保存：使用后立即用去離子水清洗超濾管，并根據(jù)制造商的說明進行消毒和保存。
三、注意事項
避免交叉污染：使用前確保超濾管是干凈的，且未被其他樣品污染。
防止堵塞：避免處理含有大量顆?；虺恋砦锏臉悠?，以防止超濾膜堵塞。
控制離心條件：過高的離心力或過長的離心時間可能導(dǎo)致超濾膜破裂或樣品損失。
樣品回收效率：由于超濾膜的截留作用，部分樣品可能會吸附在膜上或損失在離心過程中。因此，在處理珍貴樣品時，應(yīng)特別注意回收效率。
通過遵循以上建議和注意事項，可以確保正確選擇和使用賽多利斯超濾管進行樣品處理，從而獲得準確且可重復(fù)的實驗結(jié)果。