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NADPH ELISA
NADPH ELISA技術(shù)原理基于抗原抗體間的特異性結(jié)合反應(yīng)。在實(shí)驗(yàn)中，首先將針對(duì) NADPH 的特異性抗體包被在固相載體（如酶標(biāo)板）表面。當(dāng)加入含有 NADPH 的樣本時(shí)，樣本中的 NADPH 會(huì)與固相抗體發(fā)生特異性結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的另一種 NADPH 特異性抗體，從而形成 “固相抗體 - NADPH - 酶標(biāo)抗體" 的免疫復(fù)合物。在經(jīng)過多次洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，向反應(yīng)體系中加入酶的底物。酶標(biāo)抗體上的酶能夠催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，且顏色的深淺與樣本中 NADPH 的含量呈正相關(guān)關(guān)系。通過酶標(biāo)儀測(cè)定特定波長(zhǎng)下反應(yīng)體系的吸光度，再依據(jù)事先繪制好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可準(zhǔn)確計(jì)算出樣本中 NADPH 的濃度。
該技術(shù)的操作流程較為規(guī)范且精細(xì)。樣本需經(jīng)過預(yù)處理，確保其適合進(jìn)行 ELISA 檢測(cè)。之后依次進(jìn)行加樣、孵育、洗滌、加酶標(biāo)抗體、再次孵育、洗滌以及加底物顯色等步驟。每一步驟的反應(yīng)時(shí)間、溫度以及試劑的使用量都需要嚴(yán)格把控，以保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。
NADPH試劑盒技術(shù)在多個(gè)領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用。在基礎(chǔ)生物學(xué)研究中，可用于探究細(xì)胞代謝途徑、氧化應(yīng)激反應(yīng)等過程中 NADPH 的動(dòng)態(tài)變化。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，它有助于研究某些疾病的發(fā)病機(jī)制，例如在腫瘤細(xì)胞中，NADPH 代謝異常與腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，通過檢測(cè) NADPH 含量可為腫瘤的診斷與治療提供新思路。此外，在藥物研發(fā)過程中，該技術(shù)可用于評(píng)估藥物對(duì) NADPH 相關(guān)代謝通路的影響，為篩選有效的治療藥物提供數(shù)據(jù)支撐。