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            上海乾思生物科技有限公司

            免疫組織化學(xué)IHC技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)

            時間:2015-9-1閱讀:94

            關(guān)鍵詞:免疫組織化學(xué)IHC技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)
            簡介:世界*品牌免疫組織化學(xué)IHC技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
            免疫組織化學(xué)IHC技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
            我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果。
            產(chǎn)品品牌:   
            測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等。
            免疫組織化學(xué)染色
            SP法
            1)脫蠟、水化;
            2)PBS洗2~3次各5分鐘;
            3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室溫靜置10分鐘;
            4)PBS洗2~3次各5分鐘;
            5)抗原修復(fù);
            6)PBS洗2~3次各5分鐘;
            7)滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。
            8)滴加Ⅰ抗50μl,室溫靜置1小時或者4℃或者37℃1小時。
            9)4℃后需在37℃復(fù)溫45分鐘。
            10)PBS洗3次各5分鐘;
            11)滴加Ⅱ抗40~50μl,室溫靜置,或37℃1小時;
            12)II抗中可加入0.05%的tween-20。
            13)PBS洗3次各5分鐘;
            14)DAB顯色5~10分鐘,在顯微鏡下掌握染色程度;
            15)PBS或自來水沖洗10分鐘;
            16)蘇木精復(fù)染2分鐘,鹽酸酒精分化;
            17)自來水沖洗10~15分鐘;
            18)脫水、透明、封片、鏡檢。
            SABC法
            1)脫蠟、水化。
            2)PBS洗兩次各5分鐘。
            3)用蒸餾水或PBS配置新鮮的3%H2O2,室溫封閉5~10分鐘,蒸餾水洗3次。
            4)抗原修復(fù)。
            5)PBS洗5分鐘。
            6)滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。
            7)滴加Ⅰ抗,室溫1小時或者4℃或者37℃1小時(4℃后在37℃復(fù)溫45分鐘)。
            8)PBS洗三次每次2分鐘。
            9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃20分鐘。
            10)PBS洗3次每次2分鐘。
            11)滴加試劑SABC,20℃~37℃20分鐘。
            12)PBS洗4次每次5分鐘。
            13)DAB顯色:DAB顯色試劑盒或者自配顯色劑顯色(鏡下掌握顯色程度)。
            14)蒸餾水洗。蘇木素復(fù)染2分鐘、鹽酸酒精分化。
            15)脫水、透明、封片、鏡檢。
            抗體儲存容器應(yīng)由不吸附蛋白質(zhì)的材料制成,常用的有聚丙烯,聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。如儲存的抗體中蛋白濃度很低(10-100mg/L),就應(yīng)另加隔離蛋白以減少容器對抗體蛋白的吸附,隔離蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。絕大多數(shù)已稀釋的抗體應(yīng)存在4℃-8℃條件下,以免凍融對抗體蛋白產(chǎn)生有害效應(yīng)??贵w原液和已分離的免疫球蛋白組分應(yīng)保存于-20℃條件下,并避免反復(fù)凍融。冷凍的抗體溶液應(yīng)置于室溫中緩慢地解凍,應(yīng)避免用高溫快速解凍。被細(xì)菌污染的抗體常會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,應(yīng)將污染的抗體溶液及其他試劑棄之。為防止細(xì)菌污染,可于抗體溶液中加入0.01%疊氮鈉。抗體經(jīng)真空冷凍干燥后置-20℃以下可保存3-5年。保存稀釋后的單抗應(yīng)加入0.1%疊氮鈉濃度。大多數(shù)稀釋抗體可進(jìn)行冷凍保存,少數(shù)抗體可能會丟失抗原活性。大多數(shù)單抗,只要蛋白濃度適當(dāng),可在4℃下保存數(shù)月。

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