12
TIEG1 ELISA 試劑盒
TIEG1 ELISA 試劑盒專為體外精準(zhǔn)定量檢測生物樣本中 TGF-β 誘導(dǎo)早期基因 1（TIEG1）的含量而研發(fā)。TIEG1 屬于 Krüppel 樣轉(zhuǎn)錄因子家族，在細(xì)胞生長、分化、凋亡以及組織修復(fù)等多種生理過程中發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)控作用。
在正常生理狀態(tài)下，TIEG1 參與維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，確保細(xì)胞各項功能有序進(jìn)行。當(dāng)機體面臨疾病挑戰(zhàn)時，TIEG1 的表達(dá)水平會發(fā)生顯著變化。在腫瘤研究領(lǐng)域，TIEG1 表現(xiàn)出復(fù)雜的作用機制。一方面，在部分腫瘤如乳腺癌、結(jié)直腸癌中，TIEG1 可能作為抑癌基因，通過抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移，調(diào)控細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮抗癌功效。檢測 TIEG1 含量有助于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤的異常發(fā)生，評估腫瘤的惡性程度與發(fā)展趨勢。另一方面，在某些特殊腫瘤微環(huán)境下，TIEG1 的功能可能被異常激活或抑制，影響腫瘤細(xì)胞對化/療藥物的敏感性，其含量監(jiān)測可為腫瘤個性化治療方案的制定提供重要參考。在炎癥相關(guān)疾病中，如炎癥性腸病，腸道黏膜上皮細(xì)胞的 TIEG1 表達(dá)異常，參與炎癥級聯(lián)反應(yīng)的調(diào)控，檢測 TIEG1 水平有助于了解疾病的進(jìn)展程度與治療效果。
該試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)。試劑盒核心為預(yù)包被有抗人 TIEG1 單克隆抗體的微孔板。當(dāng)加入血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等生物樣本后，樣本中的 TIEG1 會特異性地與包被抗體結(jié)合。結(jié)合反應(yīng)完成后，通過嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計的洗板流程，有效去除未結(jié)合的雜質(zhì)，為后續(xù)檢測創(chuàng)造純凈環(huán)境。隨后，加入酶標(biāo)抗人 TIEG1 抗體，其會與已結(jié)合在包被抗體上的 TIEG1 進(jìn)一步結(jié)合，形成穩(wěn)固的抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。再次洗板，徹di清除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體，接著加入底物 A 和底物 B 啟動顯色反應(yīng)。在辣根過氧化物酶（HRP）的催化下，底物發(fā)生反應(yīng)，顏色逐漸顯現(xiàn)，且顏色深淺與樣本中 TIEG1 的含量呈正相關(guān)。使用者借助酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度（OD 值），依據(jù)預(yù)先繪制好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，就能精準(zhǔn)計算出樣本中 TIEG1 的濃度。
試劑盒組成科學(xué)全面，包含預(yù)包被微孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗體、底物 A、底物 B、終止液、濃縮洗滌液以及樣本xi釋液等。從原材料的嚴(yán)格篩選采購，到生產(chǎn)過程中的精細(xì)制作，再到成品的多輪嚴(yán)格檢驗，每個環(huán)節(jié)都層層把關(guān)，全力為使用者提供質(zhì)量穩(wěn)定、結(jié)果準(zhǔn)確的試劑盒。
在操作流程方面，首先要依據(jù)樣本類型妥善處理。血清樣本需自然凝固后離心取上清；血漿樣本需使用合適抗凝劑處理后離心；細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本若有沉淀需先離心去除。接下來，合理設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，分別準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)品和經(jīng)過稀釋的樣本。將微孔板放入 37℃恒溫箱中溫育，使抗原抗體充分反應(yīng)。溫育結(jié)束后，進(jìn)行洗板操作，此步驟至關(guān)重要，務(wù)必保證洗滌充分，防止殘留物質(zhì)干擾實驗結(jié)果。加入酶標(biāo)抗體后再次溫育，由于底物對光敏感，加入底物進(jìn)行顯色時，必須在避光條件下操作。顯色達(dá)到規(guī)定時間后，加入終止液終止反應(yīng)，最后使用酶標(biāo)儀讀取 OD 值。值得注意的是，不同批次的試劑盒組分嚴(yán)禁混用，整個操作過程必須嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，以此保障檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。