　　瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質(zhì)制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經(jīng)化學(xué)修飾后熔點(diǎn)降低的低熔點(diǎn)瓊脂糖，瓊脂糖的熔點(diǎn)在62-65°C之間，融化后在37°C下可維持液態(tài)數(shù)小時(shí)，30°C時(shí)凝固成膠。多用于對(duì)染色體DNA在凝膠內(nèi)進(jìn)行原位酶切及DNA的片段回收。瓊脂糖凝膠由于孔徑大常用于大分子蛋白質(zhì)、DNA的分離。

　　瓊脂糖是由瓊脂分離制備的鏈狀多糖，其結(jié)構(gòu)單元是D-半乳糖和3.6-脫水L半乳糖。許多瓊脂糖鏈依氫鍵及其它力的作用使其互相盤(pán)繞形成繩狀瓊脂糖束，構(gòu)成大網(wǎng)孔型凝膠。因此該凝膠適合于免疫復(fù)合物、核酸與核蛋白的分離、鑒定及純化。在臨床生化檢驗(yàn)中常用于LDH、CK等同工酶的檢測(cè)。

　　瓊脂糖凝膠電泳儀的使用步驟：

　　1、用蒸餾水將制膠工具洗干凈，準(zhǔn)備好制膠平板，用瓊脂將模具邊緣封閉，架好梳子；

　　2、根據(jù)要分離的樣品大小配制合適濃度的瓊脂糖凝膠。準(zhǔn)確的稱(chēng)取一定量的瓊脂糖干粉，加入到合適體積的錐形瓶中，加入一定量的電泳緩沖液，放入到微波爐內(nèi)加熱融化，冷卻片刻；

　　3、融化后的瓊脂溶液搖晃混勻，倒入電泳槽中，等其凝固；

　　4、室溫下凝固30-40min左右，小心的拔出梳子，取出凝固好的凝膠放入電泳槽內(nèi)，準(zhǔn)備上樣；

　　5、在電泳槽中倒入電泳緩沖液，沒(méi)過(guò)膠面1mm左右，去除膠孔內(nèi)的氣泡；

　　6、上樣，5ulDNA樣品加入1ul上樣緩沖液和染料，用搶混勻后加入到凝膠孔內(nèi)；

　　7、上樣結(jié)束，接通電源，紅色正極，黑色負(fù)極， DNA樣品有負(fù)極往正極運(yùn)動(dòng)，加樣孔側(cè)為負(fù)，40-50v電壓，電壓30敏左右即可；

　　8、電壓結(jié)束，關(guān)閉電源，凝膠成像儀上觀察電壓位置并比對(duì)marker判斷大小。



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