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Rhodamine 123 是一種可以通過細胞膜的選擇性染色活細胞線粒體的熒光染料,呈黃綠色熒光,多用于檢測線粒體膜電位,也常用于細胞凋亡檢測。它可以快速通過細胞膜,僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲,并且對細胞沒有任何毒性。Rhodamine 123 還用于對許多種細胞進行染色,包括植物細胞和細菌,由于細胞內(nèi) ATP 的量與 Rh123 的熒光強度之間有相關(guān)性,因此 Rh123 也被用于檢測細胞內(nèi)的 ATP。
操作步驟(僅供參考):
1、取對數(shù)生長期的細胞,將細胞密度調(diào)整到 3×105 個/ml 接種至6孔板,培養(yǎng)24h,同時應(yīng)設(shè)立陰性對照。
2、在各細胞中加入所需干預(yù)措施,繼續(xù)培養(yǎng)一定時間后,收集細胞,PBS清洗2次。
3、1ml PBS重懸細胞與EP管中,加入1ul Rhodamine 123(0.5mg/ml),37℃避光孵育20min。
4、流式細胞儀(激發(fā)波長511nm,發(fā)射波長534nm)或熒光顯微鏡下檢測。
注意事項:
1、 對于6孔板中的樣品,本試劑共可以檢測100個樣品;對于12孔中的樣品,本試劑共可以檢測200個樣品。
2、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12 個月有效。
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