新城疫病毒抗體快速檢測卡

使用說明書

（膠體金法）

【產(chǎn)品名稱】

通用名：新城疫病毒抗體檢測卡（膠體金法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Newcastle Disease Virus （GICA）

【包裝規(guī)格】 50T/盒、25T/盒

【預(yù)期用途】 新城疫又名偽雞瘟或亞洲雞瘟，是由新城疫病毒（Newcastle Disease Virus，NDV）引起的禽類的一種急性高度接觸性傳染病，以呼吸困難、下痢、神經(jīng)機(jī)能紊亂、粘膜出血為特征。

本試劑用于檢測禽類血清中新城疫病毒抗體，可用于免疫效果評價、輔助診斷等。

【原    理】

本試劑采用競爭性膠體金免疫層析試驗(GICA)原理制成，樣本加入到加樣孔后與NDV抗原、膠體金標(biāo)記物一起沿層析膜移動，若樣本中存在NDV抗體則與膠體金標(biāo)記物競爭NDV抗原，使檢測線不顯示紫紅色，若樣本中不存在NDV抗體則產(chǎn)生顏色反應(yīng)。

【新城疫病毒抗體快速檢測卡試劑盒組成】

【儲存及有效期】 儲存于陰涼干燥處（2-30℃），有效期24個月。

【樣本準(zhǔn)備】

血清：按常規(guī)方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中，靜置約1小時待血液凝固后于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘（也可將血液靜置約2小時，待血液凝固自然析出血清），分離血清。要求血清清亮，無溶血、無污染。血清樣本短期可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

全血：可采用加抗凝劑的全血作為檢測樣本（全血樣本不能冷凍）。

【試驗方法】

1.撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上。

2.用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本，垂直而緩慢的滴加1滴（約25ul）到加樣孔內(nèi)（此時觀察孔內(nèi)沒有液體流出）。

3.等待10分鐘后用裝有緩沖液的滴瓶滴加兩滴（約60ul）緩沖液到加樣孔。

4.室溫下放置10-15分鐘判斷結(jié)果，超過30分鐘的結(jié)果無效。

    注意，過量加入樣本或緩沖液會出現(xiàn)錯誤結(jié)果。

【結(jié)果判斷】

     陰性       陽性       無效       無效

1.陰性：在觀察孔內(nèi)，檢測線區(qū)（T）及對照線區(qū)（C）同時出現(xiàn)紫紅色線。意味著抗體水平低于HI滴度1:16。

2.陽性：在觀察孔內(nèi)，只有對照線區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色線。意味著抗體水平等于或高于HI滴度1:32。

3.失效：在觀察孔內(nèi)，對照線區(qū)（C）不出現(xiàn)色線。

    本試劑的檢測閾值是HI試驗1:32。所以通過對被檢血清進(jìn)行倍比稀釋，找到其呈現(xiàn)陽性的大稀釋倍數(shù)，則可以得出抗體滴度。例如：將待檢血清用生理鹽水分別做1:2（一份血清加一份生理鹽水，往后依次類推）、1:4、1:8稀釋，然后將3份不同稀釋倍數(shù)樣本分別進(jìn)行檢測，如1:2、1:4都呈陽性，而1:8呈陰性，則呈現(xiàn)陽性的大稀釋倍數(shù)為1:4，那么此份樣本的終HI試驗抗體滴度為2⁵（1:32）乘以2²（1:4）等于2⁷（1:128）。

【試驗結(jié)果的解釋】

對于免疫后的樣本，抗體水平的高低反映了免疫效果的高低。對于未經(jīng)免疫的樣本，陽性結(jié)果表明可能有NDV感染，需結(jié)合臨床及其他方法進(jìn)行分析。

【試驗方法的局限性】

 該試驗僅用于NDV抗體檢測。

【注意事項】

1.試驗前請仔細(xì)閱讀說明書，本產(chǎn)品提供的各種試劑僅供本實驗用。

2.過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品，均不可使用。

3.檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開，打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。

4.待檢樣本應(yīng)新鮮清亮，避免使用污染渾濁、嚴(yán)重溶血、大量血脂、異常粘稠的樣本。

5.避免接觸檢測卡上加樣孔和檢測窗處的層析膜。

6.試驗的廢棄物應(yīng)視為污染物，并按當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)規(guī)定妥善處理。