小鼠白介素4(IL4)小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒測定錯誤結(jié)果的原因分析

ELISA即酶聯(lián)免疫吸附試驗，是一種常用的固相酶免疫測定方法。Engvall 和Perlmann于1971年zui先應(yīng)用該法進(jìn)行了IgG定量測定，并命名為"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是：

①使抗原（或抗體）結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性；

②使抗原（或抗體）與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原（或抗體），而且此酶標(biāo)抗原（或抗體）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；

③測定時將受檢標(biāo)本（抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原（或抗體）按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng)，再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例；再加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物，根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析，以了解被測標(biāo)本中抗體或抗原含量。

小鼠白介素4(IL4)小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒添加回收的幾種誤區(qū)：

    呋喃類代謝物提取過程通常分三個關(guān)鍵步驟：

 水解-----衍生化-----提取

 (1)采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的zui大標(biāo)準(zhǔn)濃度進(jìn)行添加回收。如德國拜發(fā)和我公司AOZ試劑盒中的第6個標(biāo)準(zhǔn)點4.05ppb，AMOZ試劑盒中的第6個標(biāo)準(zhǔn)點8.1ppb。因為這些標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)過衍生化后的標(biāo)準(zhǔn)品，不能代表樣本前處理實驗中的加酸水解和加衍生化試劑衍生這兩個步驟，所以就算回收率很高，但失去了實際參考價值。

 （2）*依賴未衍生的代謝物標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行添加回收。因部分未衍生的代謝物在配制成標(biāo)準(zhǔn)品后有一定的有效期，會存在潛在的不穩(wěn)定因素，而且添加回收僅能考證衍生化和提取兩個關(guān)鍵點，不能驗證從組織蛋白中水解呋喃類代謝物的過程，因此也有一定的局限性。

 的評價方案：采用經(jīng)LC-MS-MS確證的陰陽性樣品，留作質(zhì)控樣品，對檢測的樣本和試劑盒進(jìn)行質(zhì)量評價。這也是實驗室所出數(shù)據(jù)可信度說服力的關(guān)鍵點。

加樣

 在小鼠白介素4(IL4)小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。

  加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

小鼠白介素4(IL4)小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒其他產(chǎn)品展示：xyA145Hu 人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)ELISA試劑盒
xyA146Hu 人血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)ELISA試劑盒
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xyA213Hu 人髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)ELISA試劑盒
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xyA234Hu 人免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA試劑盒
xyA252Hu 人載脂蛋白C1(APOC1)ELISA試劑盒
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xyA260Hu 人β2-微球蛋白(β2M)ELISA試劑盒
xyA262Hu 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)ELISA試劑盒
xyA275Hu 人抗SSB/La抗體(Anti-La)ELISA試劑盒
xyA277Hu 人間隙連接蛋白43(CX43)ELISA試劑盒
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