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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號(hào)	XY-0025	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。

腺伴隨病毒PCR試劑盒

Adeno-associated Virus(AAV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

腺伴隨病毒（adeno associated virus,AAV）屬細(xì)小病毒科，病毒顆粒直徑為 20nm，無(wú)包膜，20 面體，為目前動(dòng)物病毒中簡(jiǎn)單的一類(lèi)單鏈線狀 DNA 病毒。人群中，AAV 感染率很高，85%的人呈血清抗體陽(yáng)性，但是未發(fā) 現(xiàn) AAV 引起人體疾病，甚至早年的流行病學(xué)研究報(bào)告認(rèn)為，AAV 感染者減少了患癌的危險(xiǎn)性。因此快速靈敏檢測(cè)腺伴隨病毒具有重要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增腺伴隨病毒，與其他病毒沒(méi)有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

腺伴隨病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.0	1mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃色）
試劑三	腺伴隨病毒 PCR 引物混合物	100 μL（白蓋）
試劑四	腺伴隨病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（紅蓋）
試劑五	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1mL，綠蓋）
試劑六	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 20 次天凈沙核酸釋放劑試用裝

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 腺伴隨病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1 萬(wàn)倍稀釋液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分：

成分	樣品管 N+2 個(gè)	PCR 陰性對(duì)照管	標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品管（2-7 管）
PCR MagicMix 3.0	各 20μL	20μL	20 μL
腺伴隨病毒 PCR 引物混合液	各 20μL	2 μL	2 μL
N+2 個(gè)待測(cè)樣品 DNA 模板	各
PCR 陰性對(duì)照（水）		18 μL
PCR 陽(yáng)性對(duì)照（腺伴隨病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1 萬(wàn) 倍稀釋液）			18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過(guò)程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5min
PCR 反應(yīng) （35個(gè)循環(huán)）	95℃	15 sec
	72℃	60 sec
	55℃	15 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 136bp。陽(yáng)性對(duì)照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò) 增，否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。