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            上海信裕生物科技有限公司
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            人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒
            • 人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒

            貨物所在地:上海上海

            地: 中國/美國/德國

            更新時間:2025-03-24 14:02:49

            瀏覽次數(shù):202

            在線詢價收藏商機(jī)

            ( 聯(lián)系我們,請說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,謝謝?。?/p>

            人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒用于人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人真胰島素(TI)含量。價格公道,現(xiàn)貨供應(yīng)。

            人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒

            本試劑僅供研究使用

            試驗(yàn)原理

            TI試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知TI濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將TI物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TI的活性濃度呈比例關(guān)系。

             

            人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制

            試劑盒成份(2-8℃保存)

            96孔配置

            48孔配置

            配制

            96/48份酶標(biāo)板

            1塊板(96T)

            半塊板(48T)

            即用型

            塑料膜板蓋

            1塊

            半塊

            即用型

            標(biāo)準(zhǔn)品:400ng/ml

            1瓶(0.6ml)

            1瓶(0.3ml)

            按說明書進(jìn)行稀稀

            空白對照

            1瓶(1.0ml)

            1瓶(0.5ml)

            即用型

            標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液

            1瓶(5ml)

            1瓶(2.5ml)

            即用型

            生物素標(biāo)記的TI體

            1瓶(6ml)

            1瓶(3.0ml)

            即用型

            親和鏈酶素-HRP

            1瓶(10ml)

            1瓶(5.0ml)

            即用型

            洗滌緩沖液

            1瓶(20ml)

            1瓶(10ml)

            按說明書進(jìn)行稀釋

            底物A

            1瓶(6.0ml)

            1瓶(3.0ml)

            即用型

            底物B

            1瓶(6.0ml)

            1瓶(3.0ml)

            即用型

            終止液

            1瓶(6.0ml)

            1瓶(3.0ml)

            即用型

             

            自備材料

            1.  蒸餾水。

            2.  加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

            3.  振蕩器及磁力攪拌器等。

             

            安全性

            1.  避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

            2.  實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

            3.  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

             

            人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒操作注意事項(xiàng)

            1.  試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

            2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

            3.  不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

            4.  使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

            5.  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

            6.  洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

            7.  底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

            8.  加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

            9.  按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

             

            樣品收集、處理及保存方法

            1、  血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

            2、  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

            3、  細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

            4、  保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

             

            人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒試劑的準(zhǔn)備

            1.  標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:

            400ng/ml

            (6號標(biāo)準(zhǔn)品)

            原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

            200ng/ml

            (5號標(biāo)準(zhǔn)品)

            100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

            100ng/ml

            (4號標(biāo)準(zhǔn)品)

            100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

            50ng/ml

            (3號標(biāo)準(zhǔn)品)

            100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

            25ng/ml

            (2號標(biāo)準(zhǔn)品)

            100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

            12.5ng/ml

            (1號標(biāo)準(zhǔn)品)

            100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

            0ng/ml

            (空白對照)

            原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

             

            2.  洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

             

            操作步驟

            1.  使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

            2.  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

            3.  加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

            4.  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

            5.  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

            6.  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

            7.  每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

            8.  取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

            9.  在450nm波長處測定各孔的OD值。

             

            性能

            1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

            2. 特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

            3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

            4.局限性:6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。

             

             

            結(jié)果 判 斷

            1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

             

            2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的TI標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的TI含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

             

            3、檢測值范圍:0-400ng/ml

             

            4、敏感度: 1.0ng/mlxyA269Hu 【中文名稱】:人磷酯酶Cγ1(PLCγ1)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Phospholipase C Gamma 1 (PLCg1) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA697Hu 【中文名稱】:人激肽釋放酶10(KLK10)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Kallikrein 10 (KLK10) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA669Hu 【中文名稱】:人激肽釋放酶11(KLK11)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Kallikrein 11 (KLK11) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA739Hu 【中文名稱】:人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA699Hu 【中文名稱】:人環(huán)加氧酶2(PTGS2)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2 (PTGS2) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA741Hu 【中文名稱】:人Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 1 (DKK1) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA756Hu 【中文名稱】:人粘蛋白5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Mucin 5 Subtype AC (MUC5AC) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA665Hu 【中文名稱】:人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Cross Linked C-opeptide Of Type I Collagen (CTXI) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA667Hu 【中文名稱】:人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Glucokinase (GCK) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA946Hu 【中文名稱】:人淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-42 (Ab1-42) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA948Hu 【中文名稱】:人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Thymidine Phosphorylase (TP) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA672Hu 【中文名稱】:人Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Slit Homolog 2 (Slit2) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA673Hu 【中文名稱】:人多巴胺受體D2(DRD2)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Dopamine ReHZptor D2 (DRD2) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA754Hu 【中文名稱】:人肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1) 【靈敏度】:9.375pg/mL
            xyA757Hu 【中文名稱】:人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Epidermal Growth Factor ReHZptor (EGFR) 【靈敏度】:9.375pg/mL

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