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詳細(xì)介紹
重組胰蛋白酶（RTrypsin）
◆概述
胰蛋白酶（Trypsin; EC 3.4.21.4）是一種絲氨酸蛋白酶，酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組豬胰蛋白酶是由畢赤酵母重組表達(dá)并采用層析色譜法純化獲得。氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶*一致，分子量為24 kDa，適pH為7.0-9.0?？商娲i胰腺來源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過程中，如：重組胰島素生產(chǎn)；細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵；蛋白質(zhì)的酶解、測序；各種組織的細(xì)胞分離等?；钚允芙z氨酸蛋白酶抑制劑如TLCK、PMSF等的抑制，金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。
◆優(yōu)勢
● 批量生產(chǎn)規(guī)模大，批間小
● 高純度，高比活性
● 重組表達(dá)生產(chǎn)，無外源性病毒污染，生產(chǎn)過程不使用動(dòng)物來源原料
◆純度
SDS-PAGE顯示純度＞95%。
◆來源
重組畢赤酵母菌株，其克隆有來自豬的胰腺來源陽離子型胰蛋白酶基因。
◆使用方法
保存：10 mmol/L HCl，20 mmol/L CaCl2；溶解后分裝-15 ℃以下保存。
酶切體系：25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0。
推薦使用量：蛋白酶：融合蛋白質(zhì)量比1：20~1：100（肽圖或蛋白組學(xué)研究），
推薦使用量：1：200~1：2000（多肽/蛋白生產(chǎn)工藝）。
◆保存條件
儲(chǔ)存穩(wěn)定性：凍干粉存于-15 ℃以下，24個(gè)月穩(wěn)定；10 mmol/L HCl，20 mmol/L CaCl2溶解后分裝儲(chǔ)存于
儲(chǔ)存穩(wěn)定性：-15 ℃以下，反復(fù)凍融5次，未能觀察到活性損失；溶解后2~8 ℃保存建議不超過7 d。
運(yùn)輸穩(wěn)定性：冰袋保溫運(yùn)輸，活性穩(wěn)定
◆應(yīng)用實(shí)例
RTrypsin特異性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理論酶切位點(diǎn)酶切產(chǎn)物YGKR、LWK、YGK、R、RLWK，蛋白酶：合成多肽質(zhì)量比1：100，37 ℃酶切反應(yīng)10 min，LC-MS驗(yàn)證酶切反應(yīng)特異性。
Peak# | R.T. | M.W. | Sequence |
Peak 1 | 6.70 min | 366.42 | YGK |
Peak 2 | 7.61 min | 552.6 | YGKR |
Peak 3 | 17.67 min | 445.56 | LWK |
Peak 4 | 19.53 min | 601.75 | RLWK |
Peak 5 | 19.97 min | 950.15 | YGKRLWK |
◆產(chǎn)品信息
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 比活 |
RTP0102 | RTrypsin | 10 mg | 3800 USP/mg |
RTP0103 | RTrypsin | 1 mg | 3800 USP/mg |
RTP0104 | RTrypsin | 10 μg | 3800 USP/mg |
◆相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存溫度 | 其他信息 |
MDRK0101 | 重組胰蛋白酶檢測試劑盒 | 96 孔 | 2～8 ℃ | 檢測范圍 |
IRTP0101 | 固定化重組胰蛋白酶 | 1.0 mL | -15 ℃以下 | 1.0 mL含1.0 mg |