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詳細介紹
高分子β-淀粉樣蛋白寡聚體ELISA試劑盒Wako Ver.2
High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2
免疫化學用 for Immunochemistry
制造商：FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
保存條件：冷藏（冰凍運輸）
分子量：0
◆試劑盒內容
96次用
抗體固相化孔板——1個
標準溶液（10 nM）——100 μL
緩沖液——60 mL
生物素偶聯(lián)抗體（BAN50）溶液——100 μL
過氧化物酶偶聯(lián)鏈霉親和素溶液——100 μL
顯色劑1——6 mL
顯色劑2——6 mL
洗滌液（10×）——100 mL
標準品制備溶液——12 mL
血漿血清用樣品制備溶液——50 mL
封板貼——4張
◆特點
● 可檢測血漿、血清、腦脊液樣品
● 可特異性地對9-mer以上的高分子Aβ寡聚體進行定量
◆試劑盒功能
標準曲線范圍※1 |
0.41~100 pM（人腦脊液） 0.16~40 pM（人血清及EDTA抗凝血漿） |
反應Aβ寡聚體 | ≧9mer的Aβ寡聚體 |
檢測對象樣品 | 血清、EDTA抗凝血漿、腦脊液、in vitro Aβ寡聚體 |
所需樣品量 |
人腦脊液：25 μL（4倍稀釋） 人血清、血漿（EDTA）：50 μL（2倍稀釋） |
檢測時間 | 4.5 ｈ |
檢測方法※2 | 發(fā)光法 |
※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）標準品的換算值。
※2 檢測時需要準備酶標儀。
◆檢測原理
本系列采取雙抗體夾心法ELISA，使用抗Aβ抗體（BAN50）作為捕獲抗體和檢測抗體，與1~8-mer幾乎不發(fā)生反應，與9-mer以上的Aβ寡聚體則發(fā)生特異性反應。使用帶有16個抗Aβ抗體（BAN50的抗體識別序列的16-mer MAP肽作為標準品。
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|
◆高分子Aβ寡聚體的特異性數(shù)據(jù)
將Aβ1-42肽冷藏并孵育過夜后，通過超濾分離為不足30 kDa（8聚體以下）和30 kDa以上（9聚體以上），并使用Aβ抗體（BAN50）對各組進行Western Blot和ELISA（本方法）檢測。
■ Western Blot（抗Aβ抗體（BAN50）） | ■ Aβ寡聚體ELISA |
|
|
8聚體以下（＜30 kDa）的Fraction B幾乎檢測不到信號；9聚體以上（≥30 kDa）的Fraction A則檢測到強烈的信號。
◆檢測案例
檢測案例1：加標回收和稀釋度線性測試
人血漿樣品 | 未添加 | +0.5 pM標準溶液 | +1 pM標準溶液 | +5 pM標準溶液 | +30 pM標準溶液 | ||||
檢測值 | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | |
1.85 pM | 2.36 pM | 102% | 2.85 pM | * | 7.11 pM | 105% | 31.2 pM | 97.80% | |
人血清樣品 | 未添加 | +0.5 pM標準溶液 | +1 pM標準溶液 | +5 pM標準溶液 | +30 pM標準溶液 | ||||
檢測值 | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | |
1.58 pM | 2.07 pM | 98% | 2.59 pM | 101% | 6.64 pM | 101% | 31.9 pM | 101% | |
人腦脊液① | 未添加 | +3 pM標準溶液 | +6 pM標準溶液 | +15 pM標準溶液 | |||
檢測值 | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | |
5.16 pM | 8.01 pM | 95% | 10.6 pM | 91% | 18.1 pM | 86% | |
人腦脊液② | 未添加 | +10 pM標準溶液 | +15 pM標準溶液 | +35 pM標準溶液 | |||
檢測值 | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | 檢測值 | Recovery | |
29.1 pM | 38.8 pM | 97% | 44.0 pM | 99.30% | 59.9 pM | 88% | |
檢測案例2：檢測臨床樣品（腦脊液）
用本ELISA法檢測非認知癥患者（Control）、輕度認知障礙患者（MCI）阿爾茨海默?。ˋD）患者的腦脊液。
年齡 | 性別 | MMSE※3 | 腦脊液Aβ寡聚體（pM） | |
Control | 69 | M | 30 | 2.37 |
60 | F | 30 | 1.65 | |
59 | M | 30 | 2.82 | |
46 | M | 28 | 2.24 | |
60 | F | 29 | 1.34 | |
MCI | 69 | F | 24 | 3.6 |
76 | M | 23 | 2.62 | |
82 | M | 26 | 2.33 | |
69 | F | 23 | 2.67 | |
73 | F | 25 | 2.34 | |
AD | 79 | F | 10 | 3.56 |
88 | M | 24 | 3.13 | |
62 | M | 16 | 4.13 | |
78 | M | 13 | 3.95 | |
63 | M | 14 | 3.88 | |
74 | F | 16 | 3.25 | |
76 | M | 19 | 3.69 | |
84 | M | 16 | 4.34 |
※3：MMSE score：認知功能診斷問診檢查的分數(shù)
※3：MMSE score：30-28分：正常
※3：MMSE score：27-24分：懷疑有輕度認知障礙
※3：MMSE score：23分以下：懷疑嚴重認知癥
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非認知癥患者（Control）、輕度認知障礙患者（MCI）阿爾茨海默病患者（AD）間的檢測值差異明顯。
結果表明，高分子Aβ寡聚體的檢測值與MMSE Score相關。
◆對比表
產品名稱 | High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2 | High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako |
產品編號 | 290-82001 | 298-80101 |
標準曲線范圍※1 | 0.41～100 pM（人腦脊液） | 0.410~100 pM（人腦脊液） |
反應Aβ寡聚體 | ≧9 mer的Aβ寡聚體 | ≧9 mer的Aβ寡聚體 |
檢測對象樣本 | 人血清、EDTA抗凝血漿、 腦脊液in vitro Aβ寡聚體 | 人腦脊液 |
in vitro Aβ寡聚體 | ||
必要樣本體積 | 人腦脊液：25 μL（4倍稀釋） | 人腦脊液：25 μL（4倍稀釋） |
檢測時間 | 4.5 h | 4.5 h |
檢測方法※2 | 發(fā)光法 | 發(fā)光法 |
※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）標準品的換算值。
※2 檢測時需要準備酶標儀。
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
290-82001 | 高分子β-淀粉樣蛋白寡聚體ELISA試劑盒Wako Ver.2 | 96 次用 |
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產品編號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 包裝 |
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■ 免疫組織染色試劑盒
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
299-56701 | 淀粉樣β蛋白免疫組織染色試劑盒 | 50 次用 |
■ 抗Aβ抗體及抗APP抗體
產品編號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 包裝 |
017-26871 | 抗人β-淀粉樣蛋白，單克隆抗體（BAN50） | 免疫化學用 | 10μL |
013-26873 | 50μL | ||
014-26881 | β-淀粉樣蛋白，單抗(BNT77) | 免疫化學用 | 10μL |
010-26883 | 50μL | ||
018-26921 | 抗β-淀粉樣蛋白40，單克隆抗體（BA27） | 免疫化學用 | 10μL |
014-26923 | 50μL | ||
014-26901 | 抗β-淀粉樣蛋白42（43），單克隆抗體（BC05） | 免疫化學用 | 10μL |
010-26903 | 50μL | ||
014-27241 | 抗人載脂蛋白E4，單克隆抗體（3F9） | 免疫化學用 | 10μL |
010-27243 | 50μL |
■ Aβ 、Aβ相關蛋白
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
330-43071 | 人淀粉樣蛋白抗體（1-40）ELISA試劑盒 | 0.5 mg |
336-43791 | 淀粉樣β-蛋白（人，1-40）[HCl形式] | 0.5 mg |
338-43491 | 淀粉樣β蛋白（人，1-42） | 0.5 mg |
333-43701 | 淀粉樣β-蛋白（人，1-43） | 0.5 mg |
334-43591 | 淀粉樣β蛋白（人，1-16） | 0.5 mg |
330-44811 | 淀粉樣β-蛋白（人，1-28） | 0.5 mg |
331-44841 | 淀粉樣β-蛋白（人，1-38） | 0.5 mg |
333-44921 | 淀粉樣β-蛋白（人，11-40） | 0.5 mg |
330-44931 | [ pyr11 ] -淀粉樣蛋白（人，β1-40） | 0.5 mg |
334-43091 | 淀粉樣β蛋白（人，25-35） | 0.5 mg |
336-43671 | [Pyr3]-淀粉樣β蛋白（人，3-42） | 0.5 mg |
337-43581 | beta-Sheet Breaker Peptide iAbeta5 | 0.5 mg |
335-00781 | Amyloid β-Protein (1-42, O-acyl isopeptide) | 2 mg |