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富士膠片和光（廣州）貿(mào)易有限公司 |
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LabAssay™ ATX
自分泌運(yùn)動(dòng)因子（ATX: Autotaxin）是從人惡性黑色素瘤細(xì)胞的培養(yǎng)上清中分離出的一種分子量為125 kDa的糖蛋白，也是一種細(xì)胞遷移促進(jìn)因子。肝纖維化等肝臟疾病會(huì)抑制ATX的代謝，從而導(dǎo)致血液ATX水平升高。
本產(chǎn)品可檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清中的ATX。使用酶標(biāo)儀即可快速簡(jiǎn)便地檢測(cè)樣品中的ATX。
※LabAssay™系列是研究用試劑，不可用于診斷。
◆試劑盒組成
150 tests | |
反應(yīng)液 | 16 mL |
底物溶液 | 1支（8 mL用） |
ATX標(biāo)準(zhǔn)品 | 2支 |
緩沖液 | 5 mL |
反應(yīng)終止液 | 16 mL |
◆試劑盒性能
物種 | 人、小鼠、大鼠 |
樣品 | 血清、血漿（肝素）、細(xì)胞培養(yǎng)上清※ |
標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍 | 1.72-55 U/L |
所需樣品量 | 10 μL |
檢測(cè)時(shí)間 | 約40 min |
檢測(cè)方法 | 顯色法（主波長(zhǎng)546 nm/副波長(zhǎng)700 nm） |
※ 能否檢測(cè)因培養(yǎng)基而異。當(dāng)使用細(xì)胞培養(yǎng)上清作為樣品時(shí)，請(qǐng)先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行加標(biāo)回收測(cè)試或稀釋線性實(shí)驗(yàn)。
◆標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
◆原理
樣品中的ATX具有溶血磷脂酶D活性，可水解溶血磷脂酰膽-堿，生成膽-堿。由此產(chǎn)生的膽-堿在膽-堿氧化酶（COD）的作用下被氧化，生成過(guò)氧化氫。生成的膽-堿在膽-堿氧化酶（COD）的作用下被氧化，生成過(guò)氧化氫。生成的過(guò)氧化氫被定量氧化，并在過(guò)氧化物酶（POD）的作用下與 N-乙基-N-（3-磺丙基）-3-甲·基·苯·胺（TOPS）和 4-氨基安/替比林縮合，生成藍(lán)紫色色素。最后，加入反應(yīng)終止液終止反應(yīng)，測(cè)量吸光度以確定樣品中的ATX活性。
◆數(shù)據(jù)
精確度測(cè)試（批內(nèi)差異）
使用本產(chǎn)品分別對(duì)人、小鼠、大鼠的2種濃度血清、血漿（肝素）樣品進(jìn)行5次重復(fù)檢測(cè)，確認(rèn)再現(xiàn)性（精確度）。
n＼ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | |||||||||
血清1 | 血清2 | 血漿1 | 血漿2 | 血清1 | 血清2 | 血漿1 | 血漿2 | 血清1 | 血清2 | 血漿1 | 血漿2 | |
1 | 24.5 | 6.31 | 26.3 | 6.75 | 36.4 | 6.64 | 35 | 5.92 | 25.6 | 9.95 | 24.2 | 10.3 |
2 | 24.5 | 6.55 | 26.4 | 6.94 | 37.3 | 6.58 | 35 | 5.92 | 24 | 9.82 | 24 | 10.3 |
3 | 25.1 | 6.44 | 26.8 | 6.89 | 36.3 | 6.73 | 34.9 | 5.97 | 23.9 | 10.2 | 24.7 | 10.6 |
4 | 25.2 | 6.61 | 26.8 | 7.06 | 37.2 | 6.7 | 34.9 | 5.95 | 24.5 | 10 | 24.5 | 10.5 |
5 | 25.1 | 6.43 | 26.7 | 6.86 | 36.2 | 6.66 | 34.9 | 5.93 | 24.5 | 10 | 24.5 | 10.5 |
mean | 24.9 | 6.47 | 26.6 | 6.9 | 36.7 | 6.66 | 34.9 | 5.94 | 24.5 | 10 | 24.4 | 10.4 |
SD | 0.35 | 0.12 | 0.23 | 0.11 | 0.53 | 0.058 | 0.055 | 0.024 | 0.67 | 0.14 | 0.28 | 0.13 |
CV(%) | 1.4 | 1.8 | 0.88 | 1.6 | 1.4 | 0.86 | 0.16 | 0.4 | 2.8 | 1.4 | 1.1 | 1.3 |
【結(jié)果】
人樣品的CV（%）為0.88-1.8％，小鼠樣品的CV（%）為0.16-1.4％，大鼠樣品的CV（%）為1.1-2.8％，結(jié)果良好。
再現(xiàn)性測(cè)試（批間差異）
使用本產(chǎn)品在4天內(nèi)分別對(duì)3種不同濃度的人、小鼠、大鼠血清、血漿（肝素）樣品進(jìn)行3次重復(fù)檢測(cè)。
檢測(cè)單位：U/L
Day＼ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | ||||||||||||||
血清1 | 血清2 | 血清3 | 血漿1 | 血漿2 | 血漿3 | 血清1 | 血清2 | 血清3 | 血漿1 | 血漿2 | 血漿3 | 血清1 | 血清2 | 血清3 | 血漿1 | 血漿2 | |
0 | 24.4 | 18.2 | 13.7 | 26.3 | 18.7 | 14 | 41.1 | 20.6 | 9.88 | 39.8 | 20 | 9.32 | 21.7 | 15.9 | 11.8 | 21.2 | 15.1 |
1 | 24.6 | 18.3 | 13.8 | 26.5 | 18.7 | 14 | 40.9 | 20.4 | 9.82 | 39.5 | 19.9 | 9.31 | 22 | 16 | 11.9 | 21.3 | 15.2 |
2 | 23.6 | 17.5 | 13.8 | 25.4 | 18.3 | 14.6 | 40 | 20.2 | 10.1 | 40.1 | 20.2 | 9.9 | 22.7 | 16.6 | 13 | 22.3 | 15.6 |
3 | 23.6 | 17.5 | 13.8 | 25.4 | 18.3 | 14.6 | 39.4 | 20.1 | 10.1 | 39.4 | 20.1 | 9.88 | 22.8 | 16.9 | 13.1 | 22.5 | 15.7 |
mean | 24.1 | 17.9 | 13.8 | 25.9 | 18.5 | 14.3 | 40.4 | 20.3 | 10 | 39.7 | 20.1 | 9.6 | 22.3 | 16.4 | 12.5 | 21.8 | 15.4 |
SD | 0.53 | 0.43 | 0.05 | 0.58 | 0.23 | 0.35 | 0.79 | 0.22 | 0.15 | 0.32 | 0.13 | 0.33 | 0.54 | 0.48 | 0.7 | 0.67 | 0.29 |
CV(%) | 2.2 | 2.4 | 0.36 | 2.3 | 1.2 | 2.4 | 2 | 1.1 | 1.5 | 0.8 | 0.64 | 3.5 | 2.4 | 2.9 | 5.6 | 3.1 | 1.9 |
【結(jié)果】
人樣品的CV（%）為0.36%-2.2%、小鼠血清樣品的 CV（%）為0.64-3.5%，大鼠血清樣品的 CV（%）為1.9-5.6%，所有結(jié)果均良好。
稀釋線性實(shí)驗(yàn)
使用產(chǎn)品附帶的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，按倍數(shù)稀釋2種濃度的人血清/血漿（肝素）、小鼠血清/血漿（肝素）和大鼠血清/血漿（肝素）后，進(jìn)行檢測(cè)并確認(rèn)線性關(guān)系（平行檢測(cè)兩次）。
加標(biāo)回收測(cè)試
向人血清/血漿（肝素）、小鼠血清/血漿（肝素）和大鼠血清/血漿（肝素）中添加3種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，并進(jìn)行加標(biāo)回收測(cè)試（平行檢測(cè)兩次）。
人
添加量(U/L) | 實(shí)測(cè)值(U/L) | 回收量(U/L) | 回收率(%) | |
血清 | - | 5.95 | - | - |
8.05 | 13.8 | 7.85 | 97.5 | |
24.2 | 28.2 | 22.3 | 92.1 | |
40.3 | 44.9 | 39 | 96.8 | |
血漿 (肝素) | - | 7.29 | - | - |
7.69 | 14.6 | 7.31 | 95.1 | |
23.1 | 28.6 | 21.3 | 92.2 | |
38.5 | 46.9 | 39.6 | 103 |
小鼠
添加量(U/L) | 實(shí)測(cè)值(U/L) | 回收量(U/L) | 回收率(%) | |
血清 | - | 10.1 | - | - |
6.08 | 16.8 | 6.7 | 110 | |
12.2 | 21.6 | 11.5 | 94.3 | |
24.3 | 32.8 | 22.7 | 93.4 | |
血漿 (肝素) | - | 11.2 | - | - |
6.57 | 17.6 | 6.4 | 97.4 | |
13.1 | 23.8 | 12.6 | 95.9 | |
26.3 | 36.4 | 25.2 | 95.9 |
大鼠
添加量(U/L) | 實(shí)測(cè)值(U/L) | 回收量(U/L) | 回收率(%) | |
血清 | - | 10.5 | - | - |
7.42 | 18 | 7.5 | 101 | |
14.8 | 24.3 | 13.8 | 93 | |
29.7 | 38.5 | 28 | 94.4 | |
血漿 (肝素) | - | 10.7 | - | - |
7.48 | 18 | 7.3 | 97.6 | |
15 | 24.2 | 13.5 | 90.2 | |
29.9 | 38.1 | 27.4 | 91.6 |
【結(jié)果】
均得到良好的回收率。
與其他公司產(chǎn)品的相關(guān)性
分別使用本產(chǎn)品和其他公司產(chǎn)品R對(duì)同一人血清/血漿（肝素）樣品進(jìn)行檢測(cè)，確認(rèn)檢測(cè)值的相關(guān)性。檢測(cè)方法以各試劑盒的檢測(cè)操作方法為準(zhǔn)。
Sample No. | 血清 | Sample No. | 血漿（肝素） | ||
本產(chǎn)品 (U/L) | 其他公司產(chǎn)品R (ng/mL) | 本產(chǎn)品 (U/L) | 其他公司產(chǎn)品R (ng/mL) | ||
1 | 8.03 | 209 | 15 | 8.49 | 193 |
2 | 8.92 | 202 | 16 | 8.76 | 198 |
3 | 7.1 | 162 | 17 | 7.11 | 156 |
4 | 7.52 | 148 | 18 | 7.13 | 142 |
5 | 6.53 | 133 | 19 | 6.79 | 139 |
6 | 9.29 | 201 | 20 | 9.01 | 200 |
7 | 7.88 | 184 | 21 | 7.6 | 181 |
8 | 7.19 | 176 | 22 | 6.84 | 167 |
9 | 6.44 | 174 | 23 | 6.64 | 168 |
10 | 11.8 | 281 | 24 | 12.1 | 309 |
11 | 6.65 | 140 | 25 | 6.81 | 129 |
12 | 6.65 | 144 | 26 | 6.59 | 137 |
13 | 7.31 | 166 | 27 | 7.17 | 162 |
14 | 7.5 | 145 | 28 | 7.3 | 145 |
紅字:標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)可檢測(cè)的樣品及稀釋20倍后對(duì)范圍外的樣品進(jìn)行檢測(cè)
【結(jié)果】
本產(chǎn)品與其他公司產(chǎn)品R之間相關(guān)性高。另外，直接使用其他公司產(chǎn)品R對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，其數(shù)值會(huì)超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，因此需要對(duì)所有樣品進(jìn)行稀釋。而本產(chǎn)品無(wú)需稀釋即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
◆產(chǎn)品列表
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) |
| 293-96901 | LabAssay™ ATX | 150 tests | 細(xì)胞生物學(xué)用 |
相關(guān)產(chǎn)品
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) |
| 297-94601 | LabAssay™ Ammonia LabAssay™ 氨檢測(cè)試劑盒 | 700 tests | 細(xì)胞生物學(xué)用 |
| 633-51021 | LabAssay™ ALP LabAssay™ 堿-性-磷酸酶檢測(cè)試劑盒 | 500 tests | - |
| 299-96501 | LabAssay™ HDL-Cholesterol | 100 tests | 細(xì)胞生物學(xué)用 |
| 291-96701 | LabAssay™ LDL-Cholesterol | 100 tests | 細(xì)胞生物學(xué)用 |
| 291-93901 | LabAssay (TM) Creatinine LabAssay™ 肌-酐檢測(cè)試劑盒 | 500 tests | 細(xì)胞生物學(xué)用 |
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