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(一)原理

    細(xì)胞內(nèi)還原型谷胱甘肽((GSH)可保護(hù)細(xì)胞免受損傷，藥物或毒物可通過使細(xì)胞內(nèi)GSH耗竭而導(dǎo)致細(xì)胞受損。

(二)材料

1.96孔培養(yǎng)板培養(yǎng)的待測(cè)細(xì)胞與對(duì)照組細(xì)胞。

2．O．1mol／L PBS(pH8．0) 0．1mol／L Na2HPO4溶液170ml和O．1mol／L NaH2PO 4溶液34ml混勻。

3．DTNB溶液用0．1mol／L PBS配成6．5％TCA溶液。

(三)方法

    培養(yǎng)細(xì)胞的96孔培養(yǎng)板，傾去培養(yǎng)液，加入O．1mol／L PBS洗滌各孔，倒掉PRS，加入6．5％TCA 0．05ml，4℃放置30min，再加入0．25ml的DTNB溶液，10min后在420nm處比色。

(四)結(jié)果

    可計(jì)算受試物組細(xì)胞GSH的相對(duì)含量(％)

    細(xì)胞GSH的相對(duì)含量越高，則細(xì)胞毒性越低；細(xì)胞GSH的相對(duì)含量越低，則細(xì)胞毒性越高。也可計(jì)算細(xì)胞GSH的含量，但要先繪制GSH的標(biāo)準(zhǔn)曲線，方法類似于蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(五)注意事項(xiàng)

    若細(xì)胞在24孔培養(yǎng)板或6孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，可將細(xì)胞刮下來，經(jīng)超聲破碎或用溶解液溶解，再測(cè)定GSH量，但在96孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)則不必刮細(xì)胞，可直接經(jīng)6．5％TCA提取GSH，直接比色。