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            目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細胞>>小鼠原代細胞>> 小鼠胚胎成纖維細胞

            小鼠胚胎成纖維細胞
            • 小鼠胚胎成纖維細胞
            • 小鼠胚胎成纖維細胞
            • 小鼠胚胎成纖維細胞
            • 小鼠胚胎成纖維細胞
            參考價2600-6000/件
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            參考價:¥2600 ~ ¥6000

            具體成交價以合同協(xié)議為準
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            • 經(jīng)銷商 廠商性質(zhì)
            • 上海市 所在地

            更新時間:2024-12-07 08:51:19瀏覽次數(shù):424評價

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            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5x105cells/T25或1mL凍存管
            貨號 EY-XY3751 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
            主要用途 僅供科研研究實驗 生長特性 貼壁生長
            細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 組織來源 胚胎
            種屬來源 小鼠
            小鼠胚胎成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:細胞脂質(zhì)過氧化物異構(gòu)前列(ISOPROSTANE)比色法測定試劑盒
            細胞脂質(zhì)過氧化物異構(gòu)前列(ISOPROSTANE)細胞流式分析試劑盒
            冰凍切片脂質(zhì)過氧化物異構(gòu)前列(ISOPROSTANE)熒光染色試劑盒
            石蠟切片脂質(zhì)過氧化物異構(gòu)前列(ISOPROSTANE)熒光染色試劑盒
            脂質(zhì)過氧化物異構(gòu)前列(ISOPROSTANE)ELISA定量測定試劑盒

            小鼠胚胎成纖維細胞

            細胞基本屬性:

            產(chǎn)品名稱

            小鼠胚胎成纖維細胞

            組織來源

            胚胎

            種屬

            小鼠

            生長特性

            貼壁生長

            形態(tài)特征

            成纖維細胞樣

            英文名稱

            Embryonic   Fibroblasts Cells

            貨號

            EY-XY3751

            規(guī)格

            5x105cells/T251mL凍存管

            質(zhì)量檢測:VimentinKeratin蛋白免疫熒光染色法,純度高于85%,支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

            產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T251mL凍存管

            培養(yǎng)基:小鼠胚胎成纖維細胞培養(yǎng)基

            培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

            換液頻率:每2-3天換液一次

            消化液:0.25%

            產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右

            運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

            供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

            背景介紹:

            小鼠胚胎成纖維細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,小鼠胚胎成纖維細胞分離自胚胎;成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形







            原代細胞的分離培養(yǎng):

            原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性, 因此用于藥物實驗,尤其是藥物對細胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。

            (一)組織塊培養(yǎng)法

            許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng),因為方法簡單,細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進行傳代。

            1. 設(shè)備材料

            培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。

            2. 操作步驟

            (1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。

            (2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。

            (3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

            (4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。

            (5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。

            (6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。

            (7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。

            (9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進行傳代培養(yǎng)。

            QQ截圖20240105153042.png

            操作方法:

            組織塊直接培養(yǎng)法(原代細胞培養(yǎng)實驗)

            材料與儀器

            【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞,成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;

            步驟

            1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細胞直至上清清亮為止。

            公司正在出售的產(chǎn)品:

            鋅指蛋白98抗體

            細胞半-6CASPASE-6)活性比色法定量檢測試劑盒

            5-ROX蛋白標記試劑盒

            通用型人體腺病毒(adenovirus)定性檢測試劑盒

            CREB蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

            轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品35S基因檢測試劑盒

            熒光穩(wěn)定/稀釋溶液

            細胞鈣調(diào)蛋白(CaM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

            101491229812299

            全組織肌肉磷酸化酶(Myophosphorylase)活性染色試劑盒

            5-羥基二十四烯酸(5-HETE)高效液相色譜法定量檢測試劑盒

            微管(microtubules)熒光染色試劑盒

            人體細胞N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2NAT2)活性比色法定量檢測試劑盒

            載玻片細胞βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

            體液基質(zhì)金屬(MMP-13)活性熒光定量檢測試劑盒

            染色體核型吉姆莎染色分析試劑盒

            粘蛋白4重組兔單克隆抗體

            甘油二酯激酶η/DGK-η抗體

            去整合素樣金屬15抗體

            Kelch樣蛋白22抗體

            細胞角蛋白19抗體

            ZYG11A蛋白抗體

            快速周期調(diào)節(jié)蛋白SPDYE1抗體

            小鼠胚胎成纖維細胞ATP6蛋白抗體


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