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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)
iTRAQ和tmt的技術(shù)原理一樣，所不同的是二者的分子結(jié)構(gòu)有差異。與SILAC相比（標(biāo)記蛋白質(zhì)），iTRAQ和TMT是對肽段進(jìn)行標(biāo)記的。依據(jù)iTRAQ/TMT標(biāo)簽的質(zhì)量數(shù)差異，通過MS實現(xiàn)對多組樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行相對定量：
SILAC是通過一級MS( MSl)對蛋白質(zhì)進(jìn)行定量，而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS．MS2)進(jìn)行定量的iTRAQ/TMT能兼容來源的蛋白質(zhì)樣品，并且能同時分析多達(dá)8-10組的樣品，分析通量高。
1、分別提取蛋白質(zhì)并定量；
2、Trypsin分別對蛋白進(jìn)行酶解，提取肽段；
3、用不同質(zhì)量數(shù)的iTRAQ/TMT標(biāo)簽分別對肽段樣品進(jìn)行標(biāo)記：
4、標(biāo)記完成后，混合樣品，用SCX進(jìn)行組分分離（15-20組分）；
5、對每個組分進(jìn)行LC-MS分析：
6、蛋白質(zhì)鑒定與定量分析，篩選差異表達(dá)的蛋白；
7、生物學(xué)實驗驗證（Western blot，EUSA等）：
技術(shù)優(yōu)勢
1、高通量，能同時進(jìn)行多達(dá)8-10組樣品蛋白質(zhì)組的定性與定量分析；
2、兼容來源的樣品（動植物組織、細(xì)菌、血液等）；
3、實驗周期短。
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