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廣州同譜實(shí)驗(yàn)儀器有限公司
主營產(chǎn)品： kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱 |
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2017-8-22 閱讀(6336)
1．固相萃取柱的選擇
根據(jù)目標(biāo)化合物與干擾物的差異，如極性，分子量，pka值等，選擇合適的填料。
2 固相萃取柱規(guī)格的選擇
對于反相、正相和吸附型固相萃取柱來說，被萃取樣品的質(zhì)量不超SPE柱填料的5%；
離子交換型的固相萃取柱，必須考慮離子交換的容量。SAX和SCX其吸附容量為0.2mg/g，下表附SPE小柱的容量和洗脫參數(shù)
SPE柱上樣容量和洗脫體積的選擇
規(guī)格 | zui大上樣量 | zui小洗脫體積 |
100mg/1mL | 5mg | 250µL |
200mg/3mL | 10mg | 500µL |
500mg/6mL | 25mg | 1.2mL |
1g/6mL | 50mg | 2.4mL |
3．選擇合適的固相萃取方法
固相萃取的保留機(jī)制可分為兩種：
3-1 吸附劑（填料）保留目標(biāo)化合物：絕大多數(shù)化合物應(yīng)用此機(jī)制，填料保留其目標(biāo)組分及少量雜質(zhì)，通過淋洗步驟去除吸附在柱上的少量雜質(zhì)，zui后選擇合適的（洗脫）溶劑把目標(biāo)組分洗脫下來。
根據(jù)吸附劑的保留機(jī)理可進(jìn)一步分為：
（1）反相（C18,C8,CN,Phenyl,C4,C1）
a.活化：通常用水溶性有機(jī)溶劑如甲醇活化，然后用水平衡
b.淋洗：含0-50%極性溶劑的緩沖溶液淋洗雜質(zhì)
c.洗脫：極性或非極性溶劑洗脫目標(biāo)物
（2）正相（Silica, Florisil,Diol,NH2）
a.活化：非極性有機(jī)溶劑
b.洗脫：非極性有機(jī)溶劑
反相溶劑洗脫強(qiáng)度：
己烷
異辛烷
四氯甲烷
氯fang
二氯甲烷
四氫呋喃
乙mi
乙酸乙酯
丙酮
乙腈
異丙醇
甲醇
水
（3）陽離子交換（SCX,PRS,COOH）
（4）陰離子交換（SAX,PSA,NH2，PAX/MAX ）
3-2 吸附劑（填料）保留雜質(zhì)：食品中色素等雜質(zhì)的去除多用此機(jī)制。填料保留雜質(zhì)而不保留或只保留極少量的目標(biāo)組分，所以上樣后即開始收集目標(biāo)組分，zui后用目標(biāo)物所在的溶劑進(jìn)一步洗脫。合并兩部分收集液。
1）．活化：以樣品所在的有機(jī)溶劑進(jìn)化活化，1-2柱管體積
2）．上樣：提取液轉(zhuǎn)移至柱內(nèi)，并收集流出液
3）．洗脫：用樣品所在的有機(jī)溶劑進(jìn)一步洗脫，收集流出液。合并上樣和洗脫流出液。
附：固相萃取中常見物質(zhì)和處理方法
