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            廣州同譜實(shí)驗(yàn)儀器有限公司

            主營(yíng)產(chǎn)品: kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱

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            劉小姐
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            島津制備HPLC 色譜柱的選擇方法

            2020-1-20 閱讀(3232)

            填料的選擇

            在進(jìn)行制備 HPLC 時(shí),需要選擇純度盡可能高,并可同時(shí)得到大量化合物的色譜柱。硅膠基體填充制備 HPLC 色譜柱,廣泛用于合成化學(xué)、天然物化學(xué)等領(lǐng)域。反相制備 HPLC 色譜柱利用不同化學(xué)鍵合相保持峰型,實(shí)現(xiàn)高純度精制。特別是 Inertsil 系列制備 HPLC 色譜柱同時(shí)具備 HPLC 分析色譜柱的高分離性能和低吸附性。此外,在進(jìn)行制備 HPLC 時(shí),與樣品負(fù)荷量的大小、較短的色譜柱清洗時(shí)間、再平衡化時(shí)間快速化、溶劑去除的速度等相關(guān)的洗脫液的選擇很重要。可全面滿足上述項(xiàng)目要求的 Inertsil ODS-3 是更適于反相 HPLC 制備的色譜柱。

            填料

            特性

            InertSustain C18

            耐久性*,使用強(qiáng)酸強(qiáng)堿樣品及洗脫液時(shí)推薦使用。

            Inertsil ODS-4

            保留能力中等,理論塔板數(shù)、分離度適中。

            Inertsil ODS-3

            保留能力*,可獲得大負(fù)荷量的色譜柱,制備的首要之選色譜柱。

            除上述之外,也提供其他反相、正相、SEC、手性制備用色譜柱。

             

             

            色譜柱內(nèi)徑和負(fù)荷量、流量關(guān)系

            制備 HPLC 色譜柱的內(nèi)徑從 6.0mm 到 100mm 不等,可以根據(jù)使用目的及使用裝置的設(shè)定流量范圍不同進(jìn)行選擇。填料及色譜柱長(zhǎng)度等內(nèi)徑以外的條件全部相同的話,流量及樣品負(fù)荷量根據(jù)色譜柱的橫截面積的比例調(diào)整后,幾乎可以得到相同的色譜圖。以下是制備 HPLC 常用的制備柱內(nèi)徑及使用流量的總結(jié),供大家參考。

            內(nèi)徑

            負(fù)荷量

            使用流量標(biāo)準(zhǔn)(mL/min) *1

            手性

            備注

            反相·正相

            SEC

            HILIC

            4.6mm

            1

            1

            0.2~0.3

            0.5

            1

            反相、正相、HILIC、手性的規(guī)模放大研究一般使用內(nèi)徑4.6mm的色譜柱。

            7.6-

            8.0mm

            2.7

            2.7

            0.5~1.0

            1.4

            2.7

            可以用在普通分析裝置上的半制備 HPLC 色譜柱。用 SEC 的規(guī)模放大研究一般使用內(nèi)徑 7.6 ~ 8.0mm的色譜柱。

            10mm

            5

            5

            1.0~1.5

            2.4

            5

            14mm

            9

            9.2

            1.8~2.5

            4.6

            20mm

            19

            19

            3.8~5.4

            9.5

            19

            制備 HPLC 用色譜柱。由于流量范圍增大,需要使用裝置。而且,內(nèi)徑 50mm 以上的尺寸,為了使安裝配管時(shí)簡(jiǎn)單化,大多采用法蘭型式的色譜柱。

            30mm

            45

            45

            9.0~14

            21

            45

            50mm

            130

            130

            26~39

            60

            50

            *3

            100mm

            240

            480

             *2

            48~72

             *2

            120

            *2

            200

            *3

            *1:5μm 粒徑柱的情況

            *2:10μm 粒徑柱的情況

            *3:20μm 粒徑柱的情況

             

            色譜柱長(zhǎng)度

            柱長(zhǎng)

            特性

            50mm 以下

            主要作為制備柱的保護(hù)柱。

            50~100mm

            分離沒有障礙的話,可實(shí)現(xiàn)短時(shí)間制備。

            100~250mm

            常用的長(zhǎng)度。制備HPLC中,推薦使用容易取得高理論塔板數(shù)的250mm色譜柱。

            250mm 以上

            制備液相為了進(jìn)行高流量分析,使用粒徑大于10μm、壓力低的填料。由于大粒徑填料不易取得高理論塔板數(shù),在制備HPLC中會(huì)使用長(zhǎng)色譜柱彌補(bǔ)低理論塔板數(shù)這一缺陷。而且,尺寸排阻色譜為了達(dá)到相同目的,也會(huì)使用長(zhǎng)柱。

             

            制備HPLC 規(guī)模放大

            使用制備HPLC 色譜柱研究純化條件時(shí),所需樣品量和溶劑量多,造成成本高。所以,一般使用分析色譜柱探討精制條件,然后規(guī)模放大到制備色譜柱。

            但是,如果不使用具有與分析色譜柱同等性能的制備色譜柱,則可能會(huì)造成分離效果不佳。Inertsil 即使是大口徑色譜柱,峰對(duì)稱性也很好,對(duì)稱因子(Asy)接近1,理論塔板數(shù)(N)在長(zhǎng)度250mm 時(shí)維持著近20,000 段。因此,可順利實(shí)現(xiàn)從內(nèi)徑4.6mm到50mm 的規(guī)模放大。

             

            島津制備HPLC 色譜柱

            島津JET 制備色譜柱

            島津制備HPLC 保護(hù)柱

            島津 PREP 經(jīng)濟(jì)型柱套柱芯式制備柱保護(hù)柱



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