迄今為止，新型冠狀病毒仍在范圍蔓延。人體感染新冠病毒后會出現(xiàn)諸如發(fā)熱、咳嗽、咽喉痛、乏力等癥狀，尤其是新冠引發(fā)的肺部炎癥（簡稱COVID-19）及其并發(fā)癥，會導(dǎo)致患者*的死亡率?；诖?，如何實現(xiàn)新冠患者血液樣本的安全檢測已成為醫(yī)療工作者亟需解決的問題。

 01 病毒致病機(jī)理研究介紹 

新冠病毒是一種單鏈RNA包膜病毒，通過刺突（S）蛋白與宿主細(xì)胞的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）受體結(jié)合，從而進(jìn)入宿主細(xì)胞。TMPRSS2蛋白酶可以協(xié)助病毒的入侵。進(jìn)入細(xì)胞后，病毒基因釋放，編碼合成病毒復(fù)制酶和轉(zhuǎn)錄酶；隨后通過依賴RNA的RNA聚合酶（RdRp）完成RNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄；進(jìn)而合成結(jié)構(gòu)蛋白，終完成病毒顆粒的組裝和釋放。病毒生命周期的這些過程為藥物治療提供了靶點。有潛力的藥物靶標(biāo)包括非結(jié)構(gòu)蛋白（洛匹那韋/利托那韋、瑞德西韋、法匹拉韋等）、病毒入侵途徑（氯喹/羥氯喹、阿比朵爾）以及免疫調(diào)節(jié)途徑（靶向IL-6的藥物）。

圖片來源于：James M. Sanders, et al., (2020). Pharmacologic Treatments forCoronavirus Disease 2019 (COVID-19). JAMA, DOI:10.1001/jama.2020.6019

 02 抗病毒藥物TDM監(jiān)測意義  

由于目前并無新冠治療的*藥，上述授權(quán)和\或非授權(quán)藥物在臨床應(yīng)用及評價時會遇到：

①有報道的COVID-19治療藥物均屬于超說明書使用，臨床給藥劑量、頻率及患者在多器官功能受損情況下，藥物的毒副作用、相互作用等信息不明晰；體內(nèi)藥物濃度監(jiān)測可以為臨床醫(yī)生提供積極的參考，因此需求迫切；

②新冠病毒傳染性*，體內(nèi)藥物濃度評價必然會接觸到如咽拭子、血漿、血清、組織等患者樣本，如果采樣后還需要進(jìn)行人工前處理如沉淀、萃取等凈化步驟，相應(yīng)醫(yī)護(hù)人員的暴露和感染風(fēng)險會進(jìn)一步加劇。因此，盡可能的減少人工操作、減少樣品分析次數(shù)、增加樣品監(jiān)測通量、增加監(jiān)測方法的適用性（即一次進(jìn)樣分析涵蓋盡可能多的目標(biāo)待測物）；成為當(dāng)前較為行之有效的方法。

 03 島津全自動TDM監(jiān)測方案介紹 

島津公司開發(fā)了一種采用島津全自動在線前處理設(shè)備CLAM-2030和LC-MS/MS聯(lián)用系統(tǒng)，內(nèi)標(biāo)法同時監(jiān)測人血漿中瑞德西韋、洛匹那韋/利托那韋、法匹拉韋及其代謝物、阿奇霉素、羥氯喹、去乙基氯喹、氯喹等9種治療COVID-19藥物濃度的方法。

監(jiān)測藥物名稱及MRM參數(shù)

CLAM-2030是一款全自動前處理系統(tǒng)，只需簡單放置采血管或其他樣品管，系統(tǒng)就會自動完成對血樣或其他樣品的前處理，然后自動輸送至LC-MS /MS進(jìn)行分析，實現(xiàn)前處理與上機(jī)分析的無縫集成，并且能夠精密控制分析結(jié)果的重現(xiàn)性。

采用CLAM-2030與三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)系統(tǒng)，考察了血漿基質(zhì)中9種化合物的檢測限、線性、重復(fù)性；結(jié)果如下所示：

 04 結(jié)論 

結(jié)果表明，血漿基質(zhì)中，9種化合物的靈敏度、線性范圍、重復(fù)性均*臨床監(jiān)測需求，可以很好的實現(xiàn)全自動化、流程化、高通量監(jiān)測，使得監(jiān)測新冠治療藥物的過程變得更加安全和高效。

CLAM-2030系統(tǒng)能夠大限度地減少分析人員接觸生物樣本機(jī)會，降低生物感染的風(fēng)險。目前，已有眾多研究者選擇島津全自動在線前處理設(shè)備CLAM-2030和LC-MS/MS聯(lián)用系統(tǒng)來進(jìn)行血藥濃度監(jiān)測。相信他們的選擇，也是您的選擇！

撰稿：楊樂