近年來，生物藥由于其在臨床治療中的優(yōu)良表現(xiàn)發(fā)展迅猛，成為了制藥行業(yè)不可抵擋的新趨勢。在生物藥研發(fā)、生產(chǎn)過程中，企業(yè)通過引入關(guān)鍵質(zhì)量因素（CQA）對整個藥物質(zhì)量進行控制，以保證生物藥安全性和有效性。這些CQA包括氨基酸序列、聚集體、電荷異質(zhì)性、糖型和肽圖等，其中聚集體和電荷異質(zhì)性分別采用尺寸排阻色譜（SEC）、離子交換色譜（IEX）進行分析。

在使用SEC或IEX進行色譜分析過程中，通常使用高離子強度流動相，比如高濃度磷酸鹽和氯化鈉溶液，甚至pH分析條件。在這些條件下，可能會導(dǎo)致系統(tǒng)堵塞或泵頭腐蝕。此外，蛋白質(zhì)易與固定相填料或液相系統(tǒng)管路之間發(fā)生次級交互作用或吸附作用，產(chǎn)生色譜峰形拖尾，以影響色譜分離。這樣高鹽分析條件和蛋白類生物藥*性質(zhì)給液相色譜儀分離帶來嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。

Nexera Bio生物兼容液相系統(tǒng)來啦?。?！

島津生物兼容液相Nexera Bio系統(tǒng)流路采用生物惰性材料，不僅耐腐蝕，而且能減少生物大分子的吸附，保證生物大分子的完整性，有效保障分析重復(fù)性和儀器耐用性。

圖1  Nexera Bio生物兼容液相系統(tǒng)

Nexera Bio生物兼容液相系統(tǒng)特點：

• 泵頭、混合器、進樣針、樣品環(huán)和接頭配件等均采用生物惰性材料，耐腐蝕、抗吸附；

•耐高壓不銹鋼包覆的Peek管路，提升系統(tǒng)耐壓至66MPa；

•標(biāo)配輸液泵柱塞清洗蠕動泵，有效降低鹽析，實現(xiàn)良好的送液穩(wěn)定性，并防止泵頭腐蝕。

舉些“栗子”，帶您一窺究竟

•聚集體分析

圖2  mAb二聚體分析

通過優(yōu)化尺寸排阻色譜（SEC）分析單克隆抗體（mAb）的流動相組成，得到150 mmol/L磷酸鈉緩沖液和150 mmol/L氯化鈉溶液的較優(yōu)流動相條件。通過圖2對比圖可知該單抗在普通液相系統(tǒng)條件下拖尾嚴(yán)重，但在Nexera Bio系統(tǒng)下峰形對稱性良好，無拖尾現(xiàn)象。此外，重復(fù)性結(jié)果顯示，二聚體和單體的保留時間和峰面積的RSD%均小于0.5%，重復(fù)性良好（表1）。實驗數(shù)據(jù)表明Nexera Bio生物兼容色譜系統(tǒng)和Shim-pack Bio SEC色譜柱在SEC分析中，可以提供良好色譜峰型，帶來快速有效分離，保證穩(wěn)定可靠分析。

電荷異質(zhì)性分析

圖3  鹽梯度方法下mAb的電荷異質(zhì)體分析

采用Shim-pack Bio IEX和Nexera Bio生物兼容液相系統(tǒng)，在鹽梯度方法下進行mAb的電荷異質(zhì)體分布，在5min內(nèi)實現(xiàn)了電荷異質(zhì)體的高度分離。3.448min處的峰被命名為主峰。主峰之前和之后的峰分別被稱為酸性峰和堿性峰。mAb的電荷異質(zhì)體的主峰約占50.99%，酸性峰和堿性峰分別占34.94%和14.07%。且六針重復(fù)測定結(jié)果表明重現(xiàn)性非常好，所有峰保留時間RSD%均小于1%，主峰，酸性峰和堿性峰的峰面積RSD%均小于2%。實驗數(shù)據(jù)表明Nexera Bio生物兼容色譜系統(tǒng)穩(wěn)定可靠。

后小編還是要強調(diào)下在使用SEC或IEX進行色譜分析過程中，不管是高鹽還是pH條件，Nexera Bio均可長期耐受，不會造成儀器的腐蝕或堵塞等問題，更重要的是在分析過程中蛋白類藥物無吸附，無拖尾，乘風(fēng)破浪，確保生物藥分析結(jié)果的穩(wěn)定可靠。