細(xì)胞培養(yǎng)基是生物制藥的重要原料，影響生物藥的產(chǎn)量和質(zhì)量，更是規(guī)?；a(chǎn)成本控制的重要環(huán)節(jié)。

長(zhǎng)期以來(lái)，國(guó)內(nèi)無(wú)血清培養(yǎng)基主要依賴進(jìn)口，易受形勢(shì)和貿(mào)易政策的影響，尤其是2020年以來(lái)疫情爆發(fā)，國(guó)內(nèi)各單位和企業(yè)都在加速推進(jìn)疫苗和生物藥生產(chǎn)的進(jìn)度，因此對(duì)培養(yǎng)基的需求也日益增大，為了保證培養(yǎng)基安全和持續(xù)供應(yīng)，國(guó)產(chǎn)培養(yǎng)基迅速發(fā)展。

但要與占主導(dǎo)地位的進(jìn)口培養(yǎng)基競(jìng)爭(zhēng)，需要*的產(chǎn)品性能和良好的批次間質(zhì)量穩(wěn)定性作為保證。因此，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)基中糖類、氨基酸、維生素、核苷酸、脂類、代謝物等有機(jī)組分，以及鈉、鎂、鉀、鈣等無(wú)機(jī)元素組分進(jìn)行監(jiān)測(cè)和質(zhì)控至關(guān)重要。

但是目前常用的細(xì)胞培養(yǎng)基和培養(yǎng)上清液的檢測(cè)技術(shù)存在以下問(wèn)題：

? 檢測(cè)指標(biāo)少，僅分析葡萄糖、谷氨酰胺和乳酸等少數(shù)化合物；

? 無(wú)同時(shí)分析方案，一種培養(yǎng)基需要多種儀器多種方法完成檢測(cè)；

? 耗時(shí)費(fèi)力，一種培養(yǎng)基大致需3天的時(shí)間才能完成檢測(cè)。

為解決上述問(wèn)題，島津開(kāi)發(fā)了細(xì)胞培養(yǎng)上清液多組分同時(shí)分析技術(shù)，可快速檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中有機(jī)組分和無(wú)機(jī)元素的含量。

島津自*在業(yè)內(nèi)推出細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析技術(shù)以來(lái)，緊貼用戶需求，深入研究，目前已形成以下解決方案：

★ 有機(jī)組分分析解決方案，包括細(xì)胞培養(yǎng)上清液LC-MS/MS分析方法包，可以分析糖類、氨基酸、維生素、核苷酸和細(xì)胞代謝物等125種有機(jī)組分；以及脂質(zhì)介質(zhì)LC-MS/MS分析方法包，可以分析196種脂類及其代謝物；

★ 無(wú)機(jī)元素分析解決方案，可以同時(shí)分析多種無(wú)機(jī)元素。

以上解決方案，助您揭開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)上清液組分及其在培養(yǎng)過(guò)程中變化趨勢(shì)的神秘面紗。

該技術(shù)真的如此神奇嗎？接下來(lái)為您細(xì)細(xì)道來(lái)。

1有機(jī)組分分析解決方案

大家已知曉細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析方法包的大致輪廓，接下來(lái)讓我們認(rèn)識(shí)它豐富的內(nèi)涵：

★ 島津?qū)＠?/font>技術(shù)（申請(qǐng)?zhí)枺?/font>201610888146.3，申請(qǐng)日：2016.10.11）；

★17分鐘內(nèi)，同時(shí)分析125種培養(yǎng)基組分及代謝物；

★專屬數(shù)據(jù)處理軟件，快速繪制化合物含量變化  趨勢(shì)圖；

★ 內(nèi)置液相分離條件、質(zhì)譜參數(shù)和前處理方法，即裝即用，無(wú)需優(yōu)化；

★ 化合物種類全，包括糖類、核苷酸、氨基酸、有機(jī)酸、抗生素等，支持自行擴(kuò)展。

該方法包不僅囊括了您所關(guān)注的各類組分，而且分析時(shí)間短、分析參數(shù)無(wú)需優(yōu)化……

就連前處理也是簡(jiǎn)單到?jīng)]朋友呢！只需要簡(jiǎn)單蛋白沉淀和離心，即可上機(jī)分析。

下面給大家分享兩個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析方法包的應(yīng)用案例：

抗體藥物生產(chǎn)用三種不同培養(yǎng)基組分含量差異對(duì)比

部分分析結(jié)果展示如下：

上圖中縱坐標(biāo)為目標(biāo)物和內(nèi)標(biāo)物的峰面積比，橫坐標(biāo)代表三種不同的培養(yǎng)基。結(jié)果顯示1#和2#培養(yǎng)基各組分的含量相近，而3#培養(yǎng)基各組分的含量與1#和2#培養(yǎng)基相差較大。

由此可見(jiàn)，該技術(shù)既可用于培養(yǎng)基組分檢測(cè)，也可用于不同品牌和不同批次培養(yǎng)基組分含量差異檢測(cè)，更好地進(jìn)行培養(yǎng)基質(zhì)量控制。

融合蛋白藥物補(bǔ)料工藝優(yōu)化

該藥物生產(chǎn)過(guò)程中需要在第3、5和8天添加補(bǔ)料。每天取樣后添加補(bǔ)料，含量變化在補(bǔ)料后一天體現(xiàn)。連續(xù)14天取樣，采用本方法進(jìn)行分析，并繪制含量變化趨勢(shì)圖。部分結(jié)果如下所示。

三個(gè)代表化合物的含量均在第4、6和9天有明顯提升，與補(bǔ)料工藝相符。通過(guò)添加補(bǔ)料，葡萄糖含量在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中較為穩(wěn)定。胱氨酸含量需酌情增加。天冬氨酸含量可酌情減少。可見(jiàn)，該技術(shù)可以指導(dǎo)補(bǔ)料工藝優(yōu)化，也可以用于培養(yǎng)基配方優(yōu)化，助力藥物表達(dá)量的提高，同時(shí)更好地進(jìn)行培養(yǎng)基成本控制。

除上述“細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析方法包”包含的糖類、氨基酸、核苷酸和維生素等物質(zhì)外，脂類物質(zhì)也是細(xì)胞培養(yǎng)基常見(jiàn)添加物質(zhì)。

對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說(shuō)，脂類化合物是一類水不溶性的、與生物合成相關(guān)的脂肪酸及其衍生物的總稱。這類化合物可作為能量?jī)?chǔ)存，也可作為細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)組分，還可以在運(yùn)輸和信號(hào)系統(tǒng)中起作用。

因此，越來(lái)越多的客戶開(kāi)始關(guān)注細(xì)胞培養(yǎng)上清液中脂類化合物的分析?！?/span>島津脂質(zhì)介質(zhì)LC-MS/MS分析方法包》，包含花生四烯酸、DHA、EPA、乙酰醇胺和其他脂肪酸及它們的代謝物，共196種脂質(zhì)介質(zhì)化合物，可用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液中脂類物質(zhì)的分析，揭示其在培養(yǎng)過(guò)程中的含量變化趨勢(shì)，從而助力培養(yǎng)工藝優(yōu)化。

2無(wú)機(jī)組分分析解決方案

細(xì)胞培養(yǎng)液中除了含有糖類、氨基酸、維生素等有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分，還含有微量和痕量的無(wú)機(jī)元素，它們對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)又有什么作用呢？

?鈉、鉀、鎂、鈣、鐵等微量元素，可以維持細(xì)胞滲透壓平衡；

?鈷、銅、鉛、鎘等痕量元素，影響代謝途徑、某些酶和信號(hào)分子的活性；

? 額外補(bǔ)充的Zn2+、Cu2+、Mn2+等，還可以提高產(chǎn)率和改善蛋白質(zhì)量。

可以說(shuō)這些微量和痕量元素，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)可是少而精，萬(wàn)萬(wàn)*的呢！

島津公司作為細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析領(lǐng)域的者，*推出了元素分析解決方案，開(kāi)發(fā)了ICPMS-2030 測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中多種元素含量的分析方法。

應(yīng)用該技術(shù)測(cè)定了市售某細(xì)胞培養(yǎng)液中鈉、鎂、鉀、鈣等多種元素含量。樣品平行處理6份，測(cè)定結(jié)果的RSD<3%，加標(biāo)回收率在94%~109%之間。

本方法操作快速簡(jiǎn)便，樣品前處理簡(jiǎn)單，可以滿足細(xì)胞培養(yǎng)液中多元素含量的測(cè)定要求。

基于島津LC-MS/MS和ICPMS開(kāi)發(fā)的細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析平臺(tái)，可以用于細(xì)胞培養(yǎng)基組分含量測(cè)定，也可以用于培養(yǎng)基配方優(yōu)化，還可以用于培養(yǎng)基批間質(zhì)量穩(wěn)定性監(jiān)控。該技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)多組分同時(shí)檢測(cè)，方法簡(jiǎn)單、快速、易上手。助力國(guó)產(chǎn)培養(yǎng)基研發(fā)和質(zhì)控，邁上新臺(tái)階，迎來(lái)新發(fā)展，創(chuàng)造新奇跡！