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司小令第四季第四期——又想UHPLC又想SFC分析怎么辦?
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大家好,這里是司小令大講堂第四季!第三期我們?yōu)榇蠹曳窒砹酥苽湫统R界流體色譜(SFC)的特點和應(yīng)用,以及從分析規(guī)模到制備規(guī)模如何過渡。第四期我們將探討一個新話題:在日常分析過程中,有時我們可能會面臨一臺儀器無法同時滿足不同分析方法的情況,比如一臺色譜儀既想用于UHPLC又想用于SFC分析,該怎么辦呢?本期內(nèi)容就為大家?guī)斫獯稹?/span>
對于許多科研人員和實驗室工作者來說,開發(fā)分析條件時,如果能夠分別使用超高效液相色譜儀(UHPLC)和超臨界流體色譜儀(SFC),則可以從更廣泛的分離條件中找出理想的分離條件。
然而,對于實驗室管理人員來說,安裝兩臺設(shè)備將對實驗室的空間大小要求更高,使用和維護成本也比一臺設(shè)備更多;對于分析工作者來說,在同時使用UHPLC和SFC的過程中,由于分析體系不同,需要耗費大量的時間去預(yù)平衡兩種設(shè)備,不同分離條件的設(shè)置也是一件巨大的工程。這樣看來,理想和現(xiàn)實的差距還是蠻大的。那究竟有沒有兩全其美的“二合一”解決方案呢?還真有。
設(shè)計原理上,由于SFC主要是基于LC的基礎(chǔ)上再開發(fā)的,相比LC主要增加了CO2的輸送泵和控制系統(tǒng)壓力的背壓控制單元,其余的溶劑輸送泵、自動進樣器、柱溫箱和檢測器是通用的。理論上,通過在標準UHPLC系統(tǒng)中增加CO2輸送泵和背壓控制單元,即可滿足UHPLC和SFC兩種分析模式的硬件要求。
島津開發(fā)了一套集UHPLC和SFC功能于一體的 Nexera UC/s系統(tǒng),系統(tǒng)流路圖如下:
Nexera UC/s系統(tǒng)流路圖(綠色線路為使用SFC時)
硬件上:Nexera UC/s可以看作在SFC系統(tǒng)中增加了1臺UHPLC輸送泵,通過切換輸液泵和背壓控制單元的壓力開/關(guān),實現(xiàn)UHPLC和SFC兩種模式分析,這樣不僅減少了安裝空間和采購成本,同時提高了儀器整體利用率。當然,基于SFC和UHPLC分析的溶劑輸送泵、自動進樣器、柱溫箱和檢測器均可以共享的前提下,Nexera UC/s同樣支持在現(xiàn)有UHPLC系統(tǒng)升級為該系統(tǒng)。除此之外,考慮到方法開發(fā)時,不同填料色譜柱之間的手動切換效率低的情況,Nexera UC/s采用搭配流路切換閥和色譜柱切換閥,可實現(xiàn)最多12根色譜柱的自動切換,提高分析方法的開發(fā)效率。
Method Scouting Solution設(shè)定窗口
批處理序列(紅框是模式切換平衡方法)
軟件上:島津開發(fā)了一款支持在UHPLC和SFC模式之間切換的專用軟件Method Scouting Solution,可用于自動創(chuàng)建和執(zhí)行切換模式所需操作的批處理表,例如清除前一模式所用的流動相,并用下一模式所需的流動相清洗流路。
分析人員使用Method Scouting Solution軟件時,僅需5步,輸入:(1)流動相、(2)色譜柱、(3)樣品、(4)用于分析的基本方法和(5)梯度條件(初始濃度、最終濃度和梯度),軟件可以自動生成用于方法探索的批處理序列(包含了不同模式之間切換的預(yù)平衡方法)。即使是第一次使用UHPLC和SFC之間的自動切換也能輕松上手。此外,當多個分析人員使用時,可以在同一數(shù)據(jù)庫中管理所使用的色譜柱和流動相信息,以提高管理效率并最大限度地減少操作錯誤。
應(yīng)用:UHPLC/SFC模式的連續(xù)切換對于系統(tǒng)的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性提出了大的挑戰(zhàn),讓我們來看看島津Nexera UC/s的重現(xiàn)性如何。
基于Nexera UC/s切換系統(tǒng),通過UHPLC和SFC分析之間的連續(xù)切換來分析三種藥物成分,每種模式進樣5針,連續(xù)切換2次,結(jié)果見下圖,通過色譜圖疊加可以看出,UHPLC和SFC模式連續(xù)切換時,分析結(jié)果穩(wěn)定可靠,重現(xiàn)性良好。
通過UHPLC和SFC分析模式之間的切換獲得的三種藥物成分的色譜圖
總結(jié):UHPLC/SFC切換系統(tǒng)既滿足了方法開發(fā)時對不同分離模式的需要,提高分析方法開發(fā)效率;同時“二合一”的設(shè)計也能有效減少安裝空間和采購成本,提高儀器整體利用率。面對又想UHPLC又想SFC分析的困境,實現(xiàn)了“兩全其美”的效果。
好啦!今天聊了這么多,小伙伴們在超臨界流體色譜使用場景的了解是不是更豐富了呢?喜歡還請持續(xù)關(guān)注司小令哦!
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