狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            島津企業(yè)管理(中國)有限公司

            如何輕松實現(xiàn)抗體藥物中糖鏈及聚集體分析的自動化

            時間:2024-9-11 閱讀:323
            分享:

            ?

             

            圖示

描述已自動生成 

             

            在生物制藥領域,抗體藥物的生產(chǎn)過程通常是一個復雜而多階段的流程,包括從細胞培養(yǎng)到最終分析的多個步驟。在這一過程中,不僅要選擇合適的細胞株以及優(yōu)化培養(yǎng)條件,最大限度抑制聚集體形成;同時由于糖鏈的不同導致抗體活性差異,還要進行監(jiān)測及優(yōu)化,以確保最終產(chǎn)品的純度和生物活性。而這些流程往往需耗費大量人力和時間。

            圖片 

            除此之外,聚集體分析常采用尺寸排阻色譜法(SEC),在分析前需要對目標蛋白質進行純化前處理,這進一步增加了分析的復雜性?;趯|量評估的嚴苛要求,研發(fā)一個能夠無縫對抗體進行糖鏈及聚集體評估的自動化分析系統(tǒng)顯得尤為必要。

            針對這一挑戰(zhàn),島津推出生物惰性超高效液相Nexera XS inert和液體處理器 LH-40的組合,為實現(xiàn)抗體藥物中糖鏈及聚集體分析的自動化提供參考,詳情如下:

             

            1預處理(粗純化)

            樣品使用培養(yǎng)天數(shù)不同的抗體培養(yǎng)上清液(第4,7,12天),在粗純化之后進行糖鏈分析及聚集體分析。

            將第4,7,12天培養(yǎng)上清液分別取500μL,在下表條件下進行純化。由于進樣量相同,通過比較5.7min附近IgG抗體的峰面積值估計產(chǎn)量,結果顯示培養(yǎng)天數(shù)越多,IgG抗體的產(chǎn)量越高。

             

            粗純化條件

            圖片圖片 

            粗純化后的各培養(yǎng)上清液色譜圖

             

            2糖鏈分析

            使用LH-40從第1步純化獲得的抗體餾分(上圖中的黃色框內峰)中抽取40μL進樣,并在下表的條件下進行糖鏈分析。此次培養(yǎng)的抗體被認為其抗體依賴細胞導的細胞毒性作用(ADCC活性)越高,作為抗體藥物的效果也越好,高ADCC活性的糖鏈修飾狀態(tài)在峰3處洗脫。通過色譜圖對比可以看出,而隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加,峰3的吸光度在下降,說明ADCC活性在下降。

             

            糖鏈分析條件

            圖片圖片 

            各培養(yǎng)上清液中抗體糖鏈分析色譜圖

            圖片 

            糖鏈分析的各峰面積%

             

            3聚集體分析

            使用LH-40從第1步純化獲得的抗體餾分中抽取20μL進樣,按照下表條件進行聚集體分析。結果表明,隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加,聚集體的比例增多。綜上所述,這表明在此培養(yǎng)條件下,第四天的回收是最優(yōu)的。

             

            聚集體分析條件

            圖片圖片 

            不同培養(yǎng)天數(shù)的培養(yǎng)上清液中抗體聚集體分析色譜圖

            圖片 

            不同培養(yǎng)天數(shù)的聚集體峰面積%

             

            4結論

            從Protein A純化的結果來看,隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加,抗體產(chǎn)生量會變多,但通過糖鏈及聚集體分析來看,高活性抗體的比例會減少,聚集體的比例也會增加,綜合來看,選擇在第四天中回收是最合適的。

            上述分析過程中,采用生物惰性超高效液相Nexera XS inert有效解決抗體金屬吸附帶來的靈敏度和重復性問題,以及提高分析效率;液體處理器LH-40集成了自動進樣和餾分收集兩大功能,通過Nexera XS inert與LH-40的組合建立了全流程的自動化,實現(xiàn)了從Protein A純化到抗體糖鏈分析及聚集體分析的完整分析系統(tǒng)。

            圖示

描述已自動生成 

             

            本文內容非商業(yè)廣告,僅供專業(yè)人士參考。

             

             

            會員登錄

            ×

            請輸入賬號

            請輸入密碼

            =

            請輸驗證碼

            收藏該商鋪

            X
            該信息已收藏!
            標簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

            常用:

            提示

            X
            您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
            撥打電話 產(chǎn)品分類
            在線留言