乳制品牛乳中乳糖含量測定分析

1. 介紹

乳糖是兒童生長發(fā)育的主要營養(yǎng)物質(zhì)之一，對(duì)青少年智力發(fā)育十分重要，特別是新生嬰兒*的，在自然界中只有哺乳類動(dòng)物的奶中含有乳糖，各類植物性食物中是不含乳糖的。一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促進(jìn)腦苷脂類和黏多糖類的生成，因而對(duì)幼兒智力發(fā)育非常重要。乳制品企業(yè)通常通過測定牛乳中半乳糖的含量來計(jì)算牛乳中乳糖的含量。

 

2. 實(shí)驗(yàn)

設(shè)備：

ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測器

Agilent 1260 HPLC，C.01.07

試劑及耗材：

流動(dòng)相A：超純水

流動(dòng)相B：色譜純乙腈

色譜柱：Beksich糖柱，4.6*250mm,5um

（貨號(hào)：Bek445101）

柱溫箱溫度：

30C

樣品：

牛乳樣品提取物

樣品預(yù)處理: 

樣品經(jīng)蛋白沉淀后，0.45um濾膜過濾后取上清液待上樣

進(jìn)樣體積:

20ul

按78%乙腈：22%水等梯度比例進(jìn)行檢測，運(yùn)行時(shí)間為20min

流動(dòng)相流速：

0.9ml/min

 

樣品檢測：

樣品配置好后置于自動(dòng)進(jìn)樣器中，使用編輯好的方法進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣分析

3. 結(jié)果

 ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測器測定牛乳中乳糖含量

結(jié)果見表1。

表 1：乳糖定量檢測，*個(gè)峰為半乳糖

 

表2：半乳糖和葡萄糖分離度及拖尾因子情況

 

表 3：半乳糖定量曲線

 

 R=0.99903

本次實(shí)驗(yàn)的難點(diǎn)是樣品沒有紫外吸收，樣品水溶性強(qiáng)，需用乙腈稀釋，半乳糖和葡萄糖不易達(dá)到基線分離。且ELSD3300運(yùn)行參數(shù)如氣體流速和檢測溫度以及增益值必須優(yōu)化。

 

4. 結(jié)論

本方法使用ELSD3300測定了牛乳中半乳糖的含量，半乳糖和葡萄糖實(shí)現(xiàn)了基線分離，ELSD3300有平衡時(shí)間短，基線噪音小，重現(xiàn)性高和線性好等特點(diǎn)。