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細胞分布不均及解決辦法
閱讀：2021 發(fā)布時間：2017-7-7
問：我的細胞接種培養(yǎng)板，細胞總是聚集在周邊部分，該如何處理啊？我看園子里有的戰(zhàn)友的細胞卻是聚集在中間，是不是板子的質(zhì)量題目??？
答：請問你的細胞是如何混勻的？是滴管奏樂還是振蕩培養(yǎng)板？假如是后者，而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話，很有可能由于離心力的作用使細胞甩到周邊部分，導致細胞中間少，四周多！自己可是試試！
周邊一般是相對會多一點，但是中間的數(shù)目也不會很少啊~~ 展板的時候我也沒有特異往振蕩培養(yǎng)板。
大概是板子的質(zhì)量題目吧或者是不是展板時候的細胞密度太低了？我用的corning的板 。
一個好辦法：在你培養(yǎng)種板之前，把培養(yǎng)板放進培養(yǎng)箱里進行幾個小時的飽和后再取出，種進細胞時氣力要輕，可采取用滴頭在培養(yǎng)板孔的側(cè)面慢慢加進讓細胞懸液流進板孔中，培養(yǎng)的細胞基本是均勻生長。記住千萬不要用振蕩器振蕩，否則你的細胞就會想你說得那樣聚積在一起。
我今天把培養(yǎng)板放進培養(yǎng)箱里幾個小時，適當?shù)陌鸭毎芏燃哟罅艘幌拢硗舛嗉恿艘稽c培養(yǎng)液，今晚看細胞展的挺好的。我以為有兩種可能解決你題目的辦法:1.加進前奏樂均勻;2.從多孔板側(cè)邊或底邊緩慢加進。
問：我在做原代培養(yǎng)時也碰到過這種情況，我一直以為培養(yǎng)皿展膠不均勻會導致這種現(xiàn)象，由于混勻的血管段加進到培養(yǎng)皿中時，在相差顯微鏡下血管段均勻分布在培養(yǎng)皿中，24h后貼壁的血管段就是周邊多，中間相對少些。下次我要試試hkqu戰(zhàn)友的方法看能否改變這種現(xiàn)象。
答：這種現(xiàn)象很正常呀，不知你仔細觀察過沒有，孔直徑愈小，這個現(xiàn)象越明顯，我試過，24、96孔板這種現(xiàn)象不可避免，由于液體的附壁使得孔內(nèi)培養(yǎng)液不是成一個液平面，而是周邊高，就像凹鏡一樣，而使用這兩種孔板由于需要加干預等原因而不能加足量培養(yǎng)液，使得細胞隨培養(yǎng)液一起出現(xiàn)“邊集”現(xiàn)象，假如為了使孔中心也有均勻細胞而增加接種細胞數(shù)目的話，這要看你需要觀察何種指標，假如是MTT ，免疫組化的話會由于細胞成層而影響結(jié)果。
答：請問你的細胞是如何混勻的？是滴管奏樂還是振蕩培養(yǎng)板？假如是后者，而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話，很有可能由于離心力的作用使細胞甩到周邊部分，導致細胞中間少，四周多！自己可是試試！
周邊一般是相對會多一點，但是中間的數(shù)目也不會很少啊~~ 展板的時候我也沒有特異往振蕩培養(yǎng)板。
大概是板子的質(zhì)量題目吧或者是不是展板時候的細胞密度太低了？我用的corning的板 。
一個好辦法：在你培養(yǎng)種板之前，把培養(yǎng)板放進培養(yǎng)箱里進行幾個小時的飽和后再取出，種進細胞時氣力要輕，可采取用滴頭在培養(yǎng)板孔的側(cè)面慢慢加進讓細胞懸液流進板孔中，培養(yǎng)的細胞基本是均勻生長。記住千萬不要用振蕩器振蕩，否則你的細胞就會想你說得那樣聚積在一起。
我今天把培養(yǎng)板放進培養(yǎng)箱里幾個小時，適當?shù)陌鸭毎芏燃哟罅艘幌拢硗舛嗉恿艘稽c培養(yǎng)液，今晚看細胞展的挺好的。我以為有兩種可能解決你題目的辦法:1.加進前奏樂均勻;2.從多孔板側(cè)邊或底邊緩慢加進。
問：我在做原代培養(yǎng)時也碰到過這種情況，我一直以為培養(yǎng)皿展膠不均勻會導致這種現(xiàn)象，由于混勻的血管段加進到培養(yǎng)皿中時，在相差顯微鏡下血管段均勻分布在培養(yǎng)皿中，24h后貼壁的血管段就是周邊多，中間相對少些。下次我要試試hkqu戰(zhàn)友的方法看能否改變這種現(xiàn)象。
答：這種現(xiàn)象很正常呀，不知你仔細觀察過沒有，孔直徑愈小，這個現(xiàn)象越明顯，我試過，24、96孔板這種現(xiàn)象不可避免，由于液體的附壁使得孔內(nèi)培養(yǎng)液不是成一個液平面，而是周邊高，就像凹鏡一樣，而使用這兩種孔板由于需要加干預等原因而不能加足量培養(yǎng)液，使得細胞隨培養(yǎng)液一起出現(xiàn)“邊集”現(xiàn)象，假如為了使孔中心也有均勻細胞而增加接種細胞數(shù)目的話，這要看你需要觀察何種指標，假如是MTT ，免疫組化的話會由于細胞成層而影響結(jié)果。