血清25-羥基維生素D2和D3檢測同位素稀釋液相色譜串聯質譜法

閱讀：346發(fā)布時間：2025-1-13

引言

Restek

維生素 D 是一種脂溶性維生素,它對維持人體鈣、磷代謝平衡起著重要作用。維生素 D 以維生素 D₂ 和維生素 D₃兩種形式存在，它們分別經過代謝形成 25-羥基維生素 D₂ 和 D₃，這兩種代謝物是評估維生素 D 代謝的生物標志物。

缺乏維生素 D 會導致鈣吸收障礙，從而引發(fā)骨質疏松、肌肉無力、骨折等健康問題，因此臨床實踐中對維生素 D 的檢測需求急劇增加。

對此，2024 年 5 月，國家衛(wèi)健委發(fā)布了衛(wèi)生行業(yè)新標準《血清 25-羥基維生素 D₂ 和 D₃ 的檢測同位素稀釋液相色譜串聯質譜法》，該標準將于 2024 年 11 月 1 日起實施！

Restek 解決方案

該標準中推薦的色譜柱為五氟苯基柱或 C18。由于 25-羥基維生素 D₂ 和 D₃ 的差向異構體（ 3-EPI-25-羥基維生素 D₂ 和 D₃），對 25-羥基維生素 D₂ 和 D₃ 的總濃度有顯著貢獻，而這兩種差向異構體的生物活性遠低于主要代謝物;因此，必須在色譜上將 25-羥基維生素 D₂/ D₃ 與它們的差向異構體分離，才可以避免維生素 D 檢測水平偏高問題的出現。

使用 C18 色譜柱的限制主要是：生物標志物及其差向異構體不能全分離或分析時間比較長。Raptor PFPP 可以在 5 分鐘內全分離維生素 D 的生物標志物和差向異構體，因此是這個應用的更好選擇。

Restek 色譜圖 LC_CF0644

色譜條件
色譜柱	Raptor FluoroPhenyl (cat.# 9319A1E)
規(guī)格	100 mm x 3 mm ID
粒徑	2.7 μm
柱溫	30 ℃
樣品
溶劑	水 : 甲醇 = 50 : 50
濃度	25-50 ng/ mL
進樣量	5 μL
流動相	A：水（0.1% 甲酸） B：甲醇

時間(min)	流速(mL/min)	%A	%B
0.00	0.6	25	75
4.00	0.6	15	85
4.10	0.6	0	100
5.00	0.6	0	100
5.01	0.6	25	75
7.00	0.6	25	75

檢測器	MS/MS
離子化方式	ESI+
掃描方式	MRM
儀器	HPLC

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血清25-羥基維生素D2和D3檢測 同位素稀釋液相色譜串聯質譜法

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