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            上海智巖科學(xué)儀器有限公司>>技術(shù)文章>>二手貝克曼超速離心機(jī)使用操作技法

            二手貝克曼超速離心機(jī)使用操作技法

            閱讀:886        發(fā)布時(shí)間:2018-8-22
               用二手貝克曼超速離心機(jī)離心方法分離生物大分子和亞細(xì)胞物質(zhì)的基本原理是根據(jù)它們?cè)谝后w介質(zhì)中或者沉降速度不同而形成不同的區(qū)帶,或者它們的密度不同而停留在液體介質(zhì)中不同的位置而把它們一一分開(kāi)。前者是沉降速度法,應(yīng)用該法時(shí)液體介質(zhì)的大密度要小于樣品中小顆粒的密度,離心時(shí)選用高轉(zhuǎn)速和短時(shí)間;后者是沉降平衡法,應(yīng)用該法時(shí)液體介質(zhì)的大密度要大于樣品中小顆粒的密度,超速離心機(jī)離心時(shí)選用較低轉(zhuǎn)速和較長(zhǎng)時(shí)間。實(shí)際操作有幾種形式:
             
              1.差速離心 這種方法是選擇不同轉(zhuǎn)速的離心,分別分離各個(gè)不同組分。例如先用低速沉降大顆粒和上清液,在高速離心上清沉降中等顆粒,后超速離心上清沉降小顆粒。二手貝克曼超速離心機(jī)采用逐級(jí)提高離心力分離上情液的方法,把不同大小的顆粒分開(kāi)。
             
              這種方法比較簡(jiǎn)單,方便。分離的組份沉到管底,因此可以迅速濃縮所要的組份,減少體積。但回收率和純度是有矛盾的,要提高回收率,勢(shì)必提高轉(zhuǎn)速或延長(zhǎng)離心時(shí)間,這樣大小相近的顆粒也會(huì)沉到管底。因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品。
             
              2.速度區(qū)帶(或速度梯度)離心 本法是將樣品放在一個(gè)連續(xù)的密度梯度液體上,二手貝克曼超速離心機(jī)通過(guò)離心,大顆粒沉降快,小顆粒沉降慢。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間,相同的顆粒就在同一深度
             
              形成一條帶子,因此把各種組份分開(kāi)來(lái)。它適用于分離密度相同、而大小不同的物質(zhì),如不同的蛋白質(zhì)組份密度都差不多,但分子量不一樣,用本法很容易將其分
             
              開(kāi)。但對(duì)密度不同、大小類似的物質(zhì)則不易分離。

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